人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒说明书

中文简称：人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒

英文简称：IL-2sRα/CD25)ELISA KIT

特异性：Hu IL-2sRa;

检测范围：62.5pg/ml~4000pg/ml;

灵敏度：30pg/ml;标本用量：100ul/well;

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法的原理制备，适用于体外定量检测人血清、血浆、组织、体液或细胞培养上清液中的天然和重组的IL-2sRa浓度。

白介素2（IL-2）是通过结合多分子细胞受体复合物发挥生物活力的。多年来，这个受体复合物被认为是由IL-2Rα与IL-2β两个糖蛋白链组成的，两个亚基相互结合在一起形成一个高亲和力受体来传递IL-2信号的。IL-2Rα（也称为Tac抗原或CD25），是一个分子量为55kD跨膜糖蛋白，有351个氨基酸组成。IL-2β在1989年被克隆出来，它是个由575个氨基酸组成的跨膜糖蛋白，分子量为75kD，其中有286个氨基酸位于胞浆内，更显著地参与了细胞信号传导作用。常认为它是IL-2一种弱抑制剂。在任何情况下，体液中增高的可溶性IL-2Rα常伴随这T细胞与B细胞的增加与免疫系统的激活。

ELISA实验原理

人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白介素2可溶性受体α链（以下简称“A物质"）水平。用纯化的A物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入A物质再与HRP标记的A物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻di洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的A物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，通过标准曲线计算样品中A物质含量。

ELISA试剂盒组成

人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒包括：

（1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；

（2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；

（3）酶的底物；

（4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参考标准品和控制血清（定量测定中）；

（5）结合物及标本的稀释液；

（6）洗涤液，在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水；

（7）酶反应终止液，常用的HRP反应终止液为硫酸，其浓度按加量及比色液的最终体积而异，在板式ELISA中一般采用2mol/L。

结果判定方法

1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。

2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。

3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。

4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。