CPD抗凝剂实验步骤

产品名称：CPD抗凝剂
供应商：远慕生物
产品规格：100ml
用途：血液保存液，1.5mlCPD抗凝剂+10ml血，2-6℃保存21天。
注意事项：主要由柠檬酸钠、柠檬酸、葡萄糖、磷酸盐等组成。
储存条件：4℃，6个月。
检测方法: 检测方法多，检测原理清晰，主要包括比色法、微板法、速率法、苯胺法、紫外分光法、双缩脲法、凝固法等；
操作：便捷、灵敏；
应用：适用范围广泛，研究领域宽，满足科研人员的各方面需求；
产品参数：分子生物学产品参数灵活，有不同的浓度可以满足不同的实验，还可以为客户定制不同规格，不同参数的产品；
规格：产品规格从1Ml到500ml，种类很多，根据客户需求选择不同规格；
产品特性：大部分产品经过不同灭菌方式处理，使用更安全；

Anticoagulant CPD Solution（抗凝剂CPD)
1、组成成分：
A、1×TE缓冲液：10 mmol/L Tris.Cl；1mmol/L EDTA，pH 8.0。
B、1×TAE缓冲液：40 mmol/L Tris-乙酸；2mmol/L EDTA，pH 8.0。
C、1×TBE缓冲液：45 mmol/L Tris-硼酸；1mmol/L EDTA，pH 8.0。
2、用途：
A、TE缓冲液：一般用作溶解剂或保持剂，常用于溶解DNA，能稳定储存DNA。
B、TAE缓冲液:生物学中使用guang泛的核酸电泳缓冲液，主要用于DNA的琼脂糖凝胶电泳。
C、TBE缓冲液：生物学中常用的核酸电泳缓冲液，主要用于DNA的琼脂糖凝胶电泳。
3、TAE和TBE缓冲液的选择：
TAE和TBE缓冲液都可以用于DNA的琼脂糖凝胶电泳，两者各有利弊，应根据实际情况选择不同的缓冲液。

TAE和TBE缓冲液的比较
TAE缓冲液:
成分：40 mmol/L Tris-乙酸；2mmol/L EDTA
优点：超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子 缓冲容量小，长时间电泳（如过夜）不可选用。质量电泳大于 13kb 的片段时分离效果好，可用于回收 DNA pian段。
缺点：缓冲容量小，长时间电泳（如过夜）不可选用。
TBE缓冲液：
成分：45mmol/L Tris-硼酸；1mmol/L EDTA
优点：缓冲能力强，适合较长时间电泳，分辨率较高，电泳小于 1kb 的片段时分离效果好。
缺点：缓冲液中的硼酸成分会影响 DNA 回收效率以及后续的酶反应实验。
4、Anticoagulant CPD Solution（抗凝剂CPD)注意：
TBE浓溶液长时间存放后会形成沉淀物，出现沉淀后应予以废弃。

TMB的用途：
一种新型安全的色原试剂；TMB已在逐步取代强致癌物联苯胺和其他致癌性的联苯胺衍生物，应用于临床化验、法医检验、刑事侦破及环境监测等领域；尤其是在临床生化检验方面，TMB作为过氧化酶的新底物，在酶免疫分析法（EIA）和酶联免疫吸附检验法（ELISA）中获得了广泛的应用；主要应用于如下项目:潜血指纹检测；唾液中酒精的快速检测；尿联试纸的配制；肝炎病毒检测；妊娠检测试验；血液和尿液中葡萄糖、血红蛋白、白蛋白的快速测定；粪便隐血试验；血液中粒细胞值的测定、类固醇、性激素的检测；酶活性的测定；抗原、抗体及遗传物质的分析、检测；生物样品的染色；水质检测(余氯、亚硝酸盐等)。

TMB的作用:
TMB即四甲基联苯胺（3，3’，5，5’-Tetramethylbenzidine）是一种脂溶性较强的基团，因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应，且由于这种高度的脂溶性，使其易形成多聚体，在HRP活性部位产生粗大的、深兰色沉淀物，这使得TMB成为组化实验中的一种很好的发色团。同时反应产物的沉淀，使得HRP的活性部位更加暴露，利于酶氧化反应进行。
TMB的反应产物为深蓝色，Anticoagulant CPD Solution（抗凝剂CPD)利于光镜观察，且反应产物越聚越大，常超出单个细胞器的范围（而DAB则被限制在其内），故TMB反应的检测阈较低。由于上述优点，TMB是一种较强的皮肤刺激剂，并有致癌的潜在可能，故使用时应带手套及在通风条件下操作。TMB经HRP作用后共产物显蓝色，目视对比鲜明。TMB性质较稳定，可配成溶液试剂，只需与H2O2溶液混和即成应用液，可直接作底物使用。另外，TMB又有无致癌性等优点，因此在ELISA中应用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4终止后，TMB产物由蓝色呈黄色，可在比色计中定量，适吸收波长为450nm。故TMB显色的试剂盒常用450nm/630nm检测。ABTS虽不如OPD和TMB敏感，但空白值极低，也为一些试剂盒所采用。