葡聚糖凝胶LH-60分离原理

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中文名：葡聚糖凝胶LH-60

中文别名：交联葡聚糖凝胶LH-60；交联右旋糖酐

英文名：Sephadex LH-60

供应商：上海远慕

PH稳定值：2～11

操作温度：4～40℃

颗粒直径：18～111um

球蛋白分离范围：400～20000

性状：白色珠粒或粉末，属亲脂性凝胶；在san氯甲烷里面用，分离是400-2万，在甲醇或水中用，分离是400-1万，可用有机溶剂为流动相，分离脂溶性物质

用途：适用于凝胶过滤，天然产物在有机溶剂中的纯化。

葡聚糖凝胶LH-60分离原理

分离原理：

主要有两方面：以凝胶过滤作用为主，兼具反相分配的作用(在反相溶剂中)；因为凝胶过滤作用，所以大分子的化合物保留弱，先被洗脱下来，小分子的化合物保留强，zui后出柱；如果使用反相溶剂洗脱，葡聚糖凝胶LH-60对化合物还起反相分配的作用，所以极性大的化合物保留弱，先被洗脱下来，极性小的化合物保留强，后出柱；如果使用正相溶剂洗脱，这主要靠凝胶过滤作用来分离。

分离技巧:

1、分离时流速不可太快，切切不可心急，所谓欲速则不达;接馏分时可开全速，节省时间。

2、柱子尽可能长，葡聚糖凝胶柱长的增加将极大地改善分离，所不要吝惜填料，宁可将填料全装在一根大柱子中，不要将填料装成几根小柱。所谓集中优势兵力，打击敌人。

3、馏分一定要接的细，可1/10，或1/20 个保留体积接成一馏分。

4、洗脱体积一般为2-3个保留体积，对特殊保留强的化合物，可洗脱5个保留体积。

5、鞣质成分死吸附严重，如不在乎填料者，可用Sephadex LH20 分鞣质

6、葡聚糖凝胶对黄酮类成分的分离效果，方法很成型，有大量文献参考。

7、填料反复使用，每次用完，一般可用甲醇将柱子洗干净，然后用下一次分离的起步溶剂将甲醇替换出来，待用。暂时不用试可以水洗→含水醇洗(醇的浓度逐步递增)→醇洗，zui后泡在醇中贮于磨口瓶中备用。如长期不用时，可在以上处理基础上，减压抽干，再用少量乙迷洗净抽干，室温充分挥散至无醚味后，60～80°C干燥后保存。

注意事项:

1、试剂不能与手接触。

2、要用洁净的药勺，量筒或滴管取用试剂，不准用同一种工具同时连续取用多种试剂；取完一种试剂后，应将工具洗净(药勺要擦干)后，方可取用另一种试剂。

3、试剂取用后一定要将瓶塞盖紧，不可放错瓶盖和滴管，绝不允许张冠李戴，用完后将瓶放回原处。

4、已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内；另外取用试剂时应本着节约精神，尽可能少用，这样既便于操作和仔细观察现象，又能得到较好的实验结果。

层析原理：

1、凝胶过滤：依赖于分子的大小和形状

2、吸附层析：依赖于被分离化合物与凝胶之间的氢键数量和质量

3、分配层析：依赖于分离化合物在流动相(溶剂)和固定相(凝胶)之间的分配，这主要由样品的极性和溶剂的极性决定的。

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