猪基质金属蛋白酶9（MMP-9）ELISA检测试剂盒说明书

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中文名：猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒
中文别名：猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA Kit
供应商：上海远慕
规格：48T/96T
产品保存：2-8℃，有效期6个月
销售优势：量大从优、质量保证。
特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。
用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
检测种属：大小鼠、人、豚鼠、兔子、猪、犬、牛羊、鸡鸭ELISA试剂盒等种属。
常见ELISA试剂盒：白介素、选择素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、干扰素、转化生长因子、趋化因子、细胞因子受体、粘附分子、生长因子、凋亡因子等等。

猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA检测试剂盒组织结构：
1.血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心35分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心60分钟去除颗粒。
3.细胞上清液：1000×g离心32分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心33分钟，取上清液。
5.保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA检测试剂盒优点：

1.、灵敏、特异的抗体；

2.稳定的重复性和可靠性；

3.吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；

4.适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；

猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA检测试剂盒说明书技术原理：
1.抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
2.结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
3.酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。
4.受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。
5.此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
6.加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重复性好。以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA检测试剂盒说明书操作步骤：

1.使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。

3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4.甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6.甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7.每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8.取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9.在450nm波长处测定各孔的OD值。

建议使用的实验方案：

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。