NMY51感受态细胞说明书

                NMY51 Chemically Competent Cell 产品说明书

产品规格

NMY51：                     10×100μl            保存条件：- 80℃

PGADT7（control vector）：10ng/μl    10μl            保存条件：  4℃

Carrier DNA：            5ug/μl   100 μl            保存条件：  4℃

PEG/LiAc ：                       5 ml            保存条件：  4℃

基因型

MATa his3Δ200 trp1-901 leu2-3,112 ade2 LYS2::(lexAop)4-HIS3 ura3::(lexAop)₈-lacZ ade2::(lexAop) ₈-ADE2 GAL4

产品说明

NMY51感受态细胞是Dualsystems 开发的膜系统酵母双杂宿主菌,

经PGADT7质粒检测转化效率为10⁴cfu/μg DNA。

操作方法

1. 取100 μl冰上融化的NMY51感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒1-5ug，Carrier DNA（95-100度5min快速冰浴，重复一次）10 ul ，PEG/liAC  500ul并吸打几次混匀，30度水浴30 分钟（15 min时翻转6-8次混匀）。

2. 将管放42度水浴15min  （7.5 min时翻转6-8次混匀）。  

3. 5000 rpm 离心 40s 弃上清，ddH2O 400ul 重悬，离心 30s 弃上清。                      

4. ddH2O 50ul重悬，涂板。

5. 28-30度 ，培养48-96小时。

注意事项

1. 感受态细胞在冰上融化。

2. 转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。

3. 同时转化2-3种质粒时可增加质粒的用量。