上海晶抗生物工程有限公司

ELISA试剂盒标准品的浓度

时间:2016-6-20阅读:1978
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  ELISA试剂盒阴性对照及阳性对照:阴、阳性对照若有正确的结果,对试剂盒操作的结果可以有粗略的判断。
  
  其实这个主要是看显色的时候用的是什么底物了,OPD的话要避光,因为这种底物受光照后会自行变色,如果用TMB底物的话,就没这么严格了,ELISA试剂盒其他的步骤中像抗原绑定、洗涤之类也都不用避光的,只有在做完二抗洗涤完上酶显色底物的时候。因为大部分的底物对光敏感的,见光会分解,所以要求避光操作。
  
  当显色完成后(显色时间是比较短的,需要预先摸索好)加入显色终止液后溶液颜色会在几个礼拜之内保持稳定,也不用再避光了。以减去本底后的OD值为X轴,标准品的浓度为Y轴,ELISA试剂盒利用作图软件得出一个合适的计算方法。建议使用合适的软件来作图,比如CurveExpert1.4。这款软件能够给出很多种方法(比如直线、半对数、对数、四参数方程等)并从中选择一条zui合适的方程。要想检验某条曲线是否与表中数据吻合,可以将标准品的浓度作为未知数,将对应的OD值带入该方程,计算出,得到的结果应该与实际浓度很接近(+/-10%)。选择拟合度zui高的那条曲线。

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