ELISA试剂盒研发功用研讨

2017-01-10 08:41:07上海科兴商贸有限公司点击量：299

ELISA试剂盒在优化免疫学反响条件后，建立了克百威直接竞赛ELISA法和直接竞赛ELISA法，检查限分别为0.005mg／L和0.01mg／L，检查线性范围分别为0.005～10mg／L和0.01～10mg／L，并在此根底上研发了两种用于检查水、泥土、蔬菜、中毒样品的酶联免疫试剂盒，其ELISA试剂盒的重现性好，批内批间及整体变异系数均低于8.0％，试剂盒检查的正确度高， ELISA试剂盒除呕吐物样品外，其余样品的回收率均在89.62％以上。
本研究ELISA试剂盒以2，3-二氢-2，2-二甲基-7-苯并呋喃氯甲酸酯为根底组成了克百威的两种半抗原，6—[[（2，3-二氢-2，2-二甲基-7-苯并呋喃基氧）羰基]氨基]已酸（BFNH）和4—[[（2，3-二氢-2，2-二甲基-7-苯并呋喃基氧）羰基]氨基]丁酸（BFNB）。用组成的克百威免疫原免疫兔子后取得价、高特异性的抗克百威多克隆抗血清，用直接ELISA测定效价为1：16000～1：128000，纯化抗体效价为1：500000～1：4000000。并选择由BFNB-BSA免疫兔子所得的一种纯化抗体与辣根过氧化物酶偶联制备成酶标抗体，一起了测定了酶标抗体的活性，效价为1：4000。所得克百威多抗血清与丁硫克百威的穿插反响率6.19％，与呋喃酚的穿插反响率为4.00％，与供试的其它5种氨基甲酸酯类的穿插反响率均小于0.44％，对于三种有机磷的穿插反响率均低于0.12％。
ELISA试剂盒一起，依据抗体抗原的特异性反响的原理，进一步研究了抗克百威抗体对小鼠克百威中毒后的解毒效果，实验结果表明，抗体能够较好地减轻克百威对乙酰*酯酶克制效果的表现，使中毒小鼠逐步恢复正常。一起将这两种半抗原与载体蛋白牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联组成克百威免疫原和包被抗原，并用紫外光谱法测定克百威与载体蛋白物比。

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