考马斯亮蓝 R-25010g实验步骤产品介绍:
考马斯亮蓝 R-25010g实验步骤规格及成分:
产品及特点:
蛋白质样品的制备是 2D 电泳成功的关键,尤其是对植物材料,因为植物材料 不但有坚硬的细胞壁,还含有大量的、可以干扰 2D 电泳的物质(如多糖、脂类、 多酚、次生代谢物等)。本产品就是专门针对这一困难而开发,它有下列特点:
1. 可以处理各种植物材料(叶片、种子、果实等),包括新鲜或冻干的材料。
2. 操作简单,只有振荡和离心等简单步骤。 3. 能有效去除植物样品中常见的、干扰 2D 电泳的物质。
使用方法:
1、 称取 0.1-0.5g 植物组织(如果是叶片,一般用 0.2g 即可;如果是含水分多的 果实,一般用 0.3-0.5g;如果是种子,一般用 0.1g 即可),放入液氮中研磨 成粉末。
2、 加入 1 mL 溶液 A,在冰上继续研磨至成糊状。注意:如果样品富含蛋白酶, 还可以在溶液 A 中加入相应的蛋白酶抑制剂(自备)。
3、 将研磨液转移到一个干净的 1.5mL 塑料离心管中,颠倒混匀后 4℃ 15000g 离心 15 分钟。
4、 将上清液转移到一个新的 1.5mL 塑料离心管中。
5、 加入 100 uL 溶液 B,颠倒混匀。
6、 在冰上放置 15 分钟或在-20℃冰箱过夜。
7、 4℃ 15000g 离心 15 分钟,小心移弃上清液。
8、 向沉淀物加入 1mL -20℃预冷的溶液 C,震荡混合。
9、 4℃ 15000g 离心 10 分钟,移弃上清液。
10、重复步骤 8 和 9 一次
11、加入 1mL -20℃预冷的溶液 D,震荡混合后 4℃ 15000g 离心 10 分钟,去 净上清液。
12、冷冻干燥 1~2 分钟,沉淀即可放冰箱保存或加入 200uL 自备的等电聚焦上样 液在室温下(温度不要超过 30℃)溶解 30 分钟,再室温 10000g 离心 2 分 钟,将上清液转移到一个新的 1.5mL 塑料离心管中。后续试验包括 Bradford 蛋白定量和 2D 电泳。2D 电泳对蛋白上样量要求十分严格,因此强烈建议用 户在进行 2D 电泳前测定所得蛋白的浓度。
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:绿色结晶性粉末,有金属光泽。主要为五甲基副品红碱。溶于水和乙醇,呈蓝紫色溶液。也有以六甲基副品红碱称为甲基紫6B的
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)检定汞、银和锡。酸碱指示剂,生物染色
〖保存〗:RT
溴甲酚紫
〖英文名称〗:BCP ;Bromocresol purole;5',5''-Dibromo-o-cresolsulfonephthalein
〖其他名称〗:溴甲酚红;二溴邻甲酚磺呋酞;二溴邻甲酚磺酞;二溴邻甲酚磺酰酞
〖CAS号〗:115-40-2
C21H16Br2O5S=540.22
〖级别〗:IND
pH变色域:5.2(黄)~6.8(紫)
〖干燥失重〗:≤0.5%
氢氧溶解试验:合格
〖灼烧残渣〗:≤0.1%
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗:微黄色细小结晶。溶于乙醇和稀碱溶液,几乎不溶于水,〖熔点〗241~242℃。有刺激性
〖用途〗:本品仅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)酸碱指示剂、吸附指示剂。氨基酸色谱法内标。银盐法滴定硫氰酸盐。分光光度法沉淀血清蛋白
〖保存〗:RT
链霉菌 PCR Mix 6 100 次 *
常用PCR引物 100uL L- *盐酸盐
加 A 试剂盒 50 次 异硫氰酸胍
加 T 试剂盒 50 次 维生素 B1
DNA 粘转平试剂盒 20 次 二乙酸荧光素
DNA 磷酸化试剂盒 20 次 *
DNA 去磷酸化试剂盒 20 次 * A
克必隆 G 载体 2μg α- 乳糖
克必隆 B 载体 2μg 3-(3,4- 二羟基苯 )-L- *
即用型蓝白 T 载体 A 型 (T7-SP6,有 MCS) 20 次 乙二胺四乙酸 (EDTA)
即用型蓝白 T 载体 B 型 (T7-T3, 有 MCS) 20 次 L- *
即用型蓝白 T 载体 C 型 (T7-T3,无 MCS) 20 次 β- 乙醇
即用型蓝白 T 载体 D 型 ( 无启动子,有 MCS) 20 次 氯化乙酰*
即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子,无 MCS) 20 次 4- 氯 -1- 萘酚
可保种型蓝白 T 载体 50ng *
30μg L- *