D-水杨苷特殊培养法
二倍体细胞培养法与一般培养相同，关键在于传代，其传代程序为：
1.吸除旧培养液注入另瓶中。
2.用温BSS冲洗1次。
3.用0.25%温*消化，加入消化液量以仅覆盖细胞层即可；作用1~5分钟。
4.待细胞附着松动、细胞质边缘卷起和间隔加大，便终止消化。为防止细胞丢失,可不必再用BSS冲洗,直接向瓶中加入培养液（新旧培养液按2：1新旧混合）。
5.轻轻反复吹打制成单个细胞悬液。
6.按一分为二比例接种培养。
使用饲细胞(Feeder Cells)。制备方法：
1.取原代培养的人或动物胚胎成纤维细胞，90%汇合时制成细胞悬液，再按105细胞/毫升重新接种培养。
2.在细胞半汇合时，准备0.25μg/ml的丝裂霉素C，按2μg/106细胞的量加入到培养瓶中过夜；或用射线单次照射，剂量30～50戈瑞。
3.细胞经上述处理后，Hanks液漂洗两次、更换培养液、再培养24小时，*消化细胞制成悬液，按5×104（104细胞/cm2）接种入新D-水杨苷中。
4.48小时后，即可用于细胞克隆之用。
D-水杨苷细胞分离（克隆）培养
多孔塑料培养板单细胞克隆法：
1.消化：取健康待克隆细胞，吸出瓶内培养液，加消化液。
2.低密度细胞悬液的制备：做克隆细胞时首先需先用消化法制备出分散成单个细胞悬液，然后稀释细胞，使之成为1~2细胞/毫升悬液，zui适宜细胞密度为1~2细胞/ml培养液。
3.接种：先用吸管轻轻吹打细胞悬液，使混悬均匀，继用加样器向塑料培养板每孔内加0.5毫升。接种时要迅速准确，争取在zui短时间内加完，以免培养液蒸发，然后迅速盖好盖板，置CO2温箱培养。
4.标记：培养6~12小时后，待细胞下沉冰贴附于培养板孔底后，从温箱中取出，置倒置光显微镜台上，观察和标记下含有单个细胞的孔，置CO2温箱培养。在培养中一般无需换液，只有在细胞增长过于缓慢时才可进行换液。换液时先吸除旧培养基，但不要吸除过多，余少许，以免细胞干涸。然后再迅速补加新鲜克隆培养液，继续培养3~4周。待孔内细胞增至500~600个时，可进行分离培养。
5.分离扩大培养：培养86~96小时后进行观察。挑选生长良好的单细胞克隆孔，先吸除旧培养液，用Hanks洗1~2次，继加*少许，加入量已能覆盖细胞群即可，如过多，应吸除多余消化液。置于倒置显微镜下窥视，待发现细胞变圆时，加入0.1ml含10%血清的克隆培养基，用吸管轻轻吹打，当细胞离开底物悬浮后，一并吸入管内，移入另瓶或皿中，再补加一定量克隆培养液，置CO2温箱中继续培养、增殖，使之形成新的细胞群后，即转用常规培养法培养。
D-水杨苷相关产品如下：hz0259 人神经母细胞瘤细胞 IMR-32
hz0260 人大细胞肺癌细胞 NCI-H661
hz0261 人小细胞肺癌细胞 NCI-H446 [H446]
hz0262 人非小细胞肺癌细胞 NCI-H1299
hz0263 人胸膜瘤细胞 SMC-1
hz0264 人横纹肌瘤细胞 A-673
hz0265 人恶性胚胎横纹肌瘤细胞 RD
hz0266 人SV40转染成骨细胞 hFOB 1.19
hz0267 人骨肉瘤细胞 MG-63
hz0268 人骨肉瘤细胞 SW 1353
hz0269 人骨肉瘤细胞 U-2 OS
hz0270 人骨肉瘤细胞 MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D]
hz0271 人成骨肉瘤细胞 Saos-2
hz0272 人肾上腺皮质腺癌细胞 SW-13
hz0273 人肾上腺神经母细胞瘤细胞(脑转移) KP-N-NS
hz0274 人脑星形胶质母细胞瘤 U-87 MG
hz0275 人神经母细胞瘤细胞 SH-SY5Y
hz0276 人神经母细胞瘤细胞 SK-N-BE(2)
hz0277 人神经母细胞瘤细胞 SK-N-SH
hz0278 人神经上皮瘤细胞 SK-N-MC
hz0279 人胶质瘤细胞 SHG-44
hz0280 人胶质瘤细胞 U251
hz0281 人胶质母细胞瘤细胞 A172
hz0282 人恶性黑色素瘤细胞 A-375
hz0283 人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞 CCRF-CEM [CCRF CEM]
hz0284 人Ph+急淋白血病细胞系 SUP-B15
hz0285 人组织细胞淋巴瘤细胞 U-937
hz0286 人B淋巴母细胞 HMy2.CIR
hz0287 人Burkitt's淋巴瘤细胞 NAMALWA
hz0288 人Burkitt's淋巴瘤细胞 Raji
hz0289 人EB病毒转化的B细胞 CGM1
