基础三糖铁琼脂(TSI)
绝大多数培养基是建立在*(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。zui广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学zui通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。例如,有些培养基在氨基酸中包括有*,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对*敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非*选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有*,据报道也有神经毒效应。
三糖铁琼脂(TSI)制备方法:
1. 培养同源细胞(未克隆前时的同一细胞)至半汇合状态时,更换一次培养液,再继续培养24~48小时后,吸出所有培养液。
2. 离心:3000~4000/分离心10分钟,吸取上清液。
3. 滤过:再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤,低温冻存贮备用;用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。
生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求,若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分,将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路,一是让培养细胞提供自己的营养因子,二是在三糖铁琼脂(TSI)中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长,所需的生长因子便会积累到可观的数值,尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求,可保持培养基在一段时间里不作任何变动,以使营养(生长)因子积累,而zui后促使所需要的细胞类型能够生长。但是,这种对营养(生长)因子自身倚赖性亦有弊端,因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖,某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外,这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基(经过了高密度培养)进行,或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。
满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过,只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。
三糖铁琼脂(TSI)相关产品如下:hz0301 人成巨核细胞白血病细胞 MEG-01
hz0302 人成巨核细胞白血病细胞 Daudi
hz0303 人单核细胞白血病 THP-1
hz0304 人原髓细胞白血病细胞 HL-60
hz0305 人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞, NK-92
hz0306 人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞, NK-92MI
hz0307 人套细胞淋巴瘤细胞 JeKo-1
hz0308 小鼠X小鼠 PK136
hz0309 小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞 NG108-15 [108CC15]
hz0310 杂交瘤细胞CD25 PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]
hz0311 中国仓鼠X小鼠B淋巴细胞杂交瘤 MR1 [derivative of HB-11048]
hz0312 杂交瘤细胞抗AChE AE-1
hz0313 杂交瘤细胞抗AChE AE-2
hz0314 杂交瘤细胞抗CD2 OKT 11
hz0315 杂交瘤细胞抗CD2 35.1
hz-1101 DU145(前列腺癌细胞)
hz-1102 Lncap(前列腺癌细胞)
hz-1103 PC-3(前列腺癌细胞)
hz-1104 MOLT-4(急性淋巴母细胞白血病细胞)
hz-1105 5637(膀胱癌细胞)
hz-1106 Raji(Burkitt's 淋巴瘤细胞)
hz-1107 SCaBER(膀胱鳞癌细胞)
hz-1108 NAMALWA(Burkitt's 淋巴瘤细胞)
hz-1109 T24(膀胱移行细胞癌细胞)
hz-1110 HuT78(T淋巴细胞白血病细胞)
hz-1111 SW-13(肾上腺皮质腺癌细胞 )
hz-1112 SW-13(肾上腺皮质腺癌细胞 )
hz-1113 Dami(巨核细胞白血病细胞)
hz-1114 OS-RC-2(肾癌细胞)
hz-1115 MEG-01


















