基础沙氏琼脂培养基(SDA)
绝大多数培养基是建立在*(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。zui广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学zui通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。例如,有些培养基在氨基酸中包括有*,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对*敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非*选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有*,据报道也有神经毒效应。
沙氏琼脂培养基(SDA)制备方法:
1. 培养同源细胞(未克隆前时的同一细胞)至半汇合状态时,更换一次培养液,再继续培养24~48小时后,吸出所有培养液。
2. 离心:3000~4000/分离心10分钟,吸取上清液。
3. 滤过:再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤,低温冻存贮备用;用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。
生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求,若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分,将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路,一是让培养细胞提供自己的营养因子,二是在沙氏琼脂培养基(SDA)中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长,所需的生长因子便会积累到可观的数值,尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求,可保持培养基在一段时间里不作任何变动,以使营养(生长)因子积累,而zui后促使所需要的细胞类型能够生长。但是,这种对营养(生长)因子自身倚赖性亦有弊端,因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖,某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外,这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基(经过了高密度培养)进行,或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。
满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过,只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。
沙氏琼脂培养基(SDA)相关产品如下:hz1157 3%氯化钠碱性蛋白胨水 250g 用于副溶血性弧菌的前增菌培养(SN标准)
3%NaCl Alkaline Peptone Water
hz1158 60g/L氯化钠蛋白胨肉汤 250g 用于副溶血性弧菌的前增菌培养(SN标准)
60g/L NaCl Peptone Water
hz1159 氯化钠三糖铁琼脂 250g 用于副溶血性弧菌的生化反应筛选(SN标准)
NaCl Triple Sugar Iron Agar
hz1161 胰胨大豆琼脂斜面(高盐) 250g 培养副溶血性弧菌,做细胞色素氧化酶实验(SN标准)
Trypcasein Soy Agar
hz1162 42℃生长培养基 250g 用于副溶血性弧菌42℃生长试验(SN标准)
42℃growth Medium
hz1163 O/F培养基(HLGB) 250g 用于鉴别弧菌葡萄糖代谢类型(发酵型或氧化型)(SN标准)
O/F Medium
hz1164 氯化钠结晶紫增菌液 250g 用于副溶血性弧菌的选择性增菌培养(GB标准)
Sodium Chloride Violet Purple Enrichment Broth
hz1165 氯化钠蔗糖琼脂 250g 用于副溶血性弧菌的选择性分离培养(GB标准)
Sodium Chloride Sucrose Agar
hz1166 嗜盐菌选择性琼脂 250g 用于副溶血性弧菌的选择性分离培养(GB标准)
Halophilic Bacteria Selective Agar
hz1167 氯化钠血琼脂基础 250g 用于副溶血性弧菌的溶血试验(GB标准)
Sodium Chloride Blood Agar Base
hz1168 霍乱双糖铁琼脂(KIA) 250g 用于霍乱弧菌的生化试验(SN标准)
Kligler Iron Agar
hz1169 T1N1琼脂 250g 用于霍乱弧菌的培养(SN标准)
T1N1 Agar
hz1170 T1N0肉汤 250g 用于霍乱弧菌的生长试验(SN标准)
T1N0 Broth
hz1171 T1N3肉汤 250g 用于霍乱弧菌的生长试验(SN标准)
T1N3 Broth
hz1172 *葡萄糖斜面琼脂 250g 用于霍乱弧菌的复合生化试验(SN标准)
Arginine Dextrose Agar
hz1180 胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TSB-YE) 250g 用于单增李氏菌增菌肉汤(EB)的配制(SN,GB,FDA标准)
Trypticase Soy-Yeast Extract Broth


















