基础NA+0.25%*酶
绝大多数培养基是建立在*(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。zui广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学zui通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。例如,有些培养基在氨基酸中包括有*,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对*敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非*选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有*,据报道也有神经毒效应。
NA+0.25%*酶制备方法:
1. 培养同源细胞(未克隆前时的同一细胞)至半汇合状态时,更换一次培养液,再继续培养24~48小时后,吸出所有培养液。
2. 离心:3000~4000/分离心10分钟,吸取上清液。
3. 滤过:再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤,低温冻存贮备用;用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。
生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求,若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分,将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路,一是让培养细胞提供自己的营养因子,二是在NA+0.25%*酶中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长,所需的生长因子便会积累到可观的数值,尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求,可保持培养基在一段时间里不作任何变动,以使营养(生长)因子积累,而zui后促使所需要的细胞类型能够生长。但是,这种对营养(生长)因子自身倚赖性亦有弊端,因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖,某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外,这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基(经过了高密度培养)进行,或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。
满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过,只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。
NA+0.25%*酶相关产品如下:hz1015 胰蛋白胨大豆肉汤 250g 用于*的MPN测定,增菌培养,NaCl浓度可根据需要而调整(GB,SN标准)
Trypticase (Tryptic) Soy Broth
hz1072 Baird-Parker琼脂基础 250g 用于*的选择性分离培养(GB,SN,FDA标准)
Baird-Parker Agar Base
hz1073 改良Giolitti-Cantoni肉汤 250g 用于*的增菌培养(ISO标准)
Giolitti-Cantoni Broth
hz1074 7.5%氯化钠肉汤 250g 用于*的增菌培养(GB标准)
7.5% Sodium Chloride Broth
hz1007 营养肉汤培养基 250g 用于*的增菌培养(SN标准)
Broth Medium
hz1111 亚碲酸钠肉汤培养基基础 250g 用于*增菌培养,每100ml 培养基需另加入1%亚碲酸钠1ml
Yolk lurite Broth Base
hz1112 葡萄球菌增菌肉汤 250g 用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性增菌
Staphylococcus Enrichment Broth
hz1113 葡萄球菌选择性琼脂 250g 用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性分离培养
Staphylococcus Selective Aga
hz1114 卵黄*高盐琼脂基础 250g 用于食品中*的选择性分离培养
Egg-Manitol Salt Agar
hz1115 血液琼脂基础 250g 供分离营养要求较高的致病菌用,后加血液制成血平板
Blood Agar Base
hz1020 脑心浸出液肉汤 250g 用于营养要求较高的微生物的培养
Brain Heaet Infusion Broth
hz1021 哥伦比亚琼脂 250g 用于营养要求较高的微生物的培养及溶血试验
Columbia Agar Base
hz1118 *氯化钠琼脂 250g 用于*选择性分离培养
Mannitol Salt Agar
hz1119 *发酵培养基 250g 用于鉴别*发酵试验
Mannitol Ferment Medium
hz1120 甲*蓝-DNA琼脂 250g 用于*核酸酶试验
Toluidine Blue -DNA Agar


















