基础TSA+*+吐温80
绝大多数培养基是建立在*(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。zui广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学zui通用的培养基。Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。例如,有些培养基在氨基酸中包括有*,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对*敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非*选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。F12中含有*,据报道也有神经毒效应。
TSA+*+吐温80制备方法:
1. 培养同源细胞(未克隆前时的同一细胞)至半汇合状态时,更换一次培养液,再继续培养24~48小时后,吸出所有培养液。
2. 离心:3000~4000/分离心10分钟,吸取上清液。
3. 滤过:再经直径0.22μm滤孔的滤膜过滤,低温冻存贮备用;用时取1分适应培养基+2培养基混合使用。
生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求,若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分,将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡。解决这一问题有两条思路,一是让培养细胞提供自己的营养因子,二是在TSA+*+吐温80中加入纯的生长因子。如果细胞混合物能在高密度时生长,所需的生长因子便会积累到可观的数值,尤其当培养基很少变化时。若某种细胞混合物生长时有很少的营养需求,可保持培养基在一段时间里不作任何变动,以使营养(生长)因子积累,而zui后促使所需要的细胞类型能够生长。但是,这种对营养(生长)因子自身倚赖性亦有弊端,因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖,某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制。另外,这种方法只能进行相当高密度的细胞培养。因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效。不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基(经过了高密度培养)进行,或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持。
满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子。通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF。不过,只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长。
TSA+*+吐温80相关产品如下:Lactose Bile Medium
hz1039 乳糖蛋白胨培养基 250g 用于饮用水,水源水中总大肠菌群的测定
Lactose Peptone Broth
hz1041 伊红美蓝琼脂 (EMB) 250g 弱选择性培养基,用于分离肠道致病菌,特别是大肠杆菌
Eosin-Methylene Blue Agar
hz1042 亮绿琼脂 250g 用于饮用水,水源水中沙门氏菌选择性增菌
Brilliant Green Lactose Broth
hz1043 亮绿乳糖培养基 250g 用于饮用天然矿泉水中大肠杆菌的检验(GB标准)
Brilliant Green Lactose Medium
hz1044 品红亚*琼脂(远滕氏琼脂) 250g 用于饮用水、水源水中总大肠菌群的选择性分离和确证
hz1045 Fuchsin Basic Sodium Sulfite Agar
hz1045 去氧胆酸盐琼脂 250g 用于大肠杆菌固体平板测定,肠道菌选择性分离
Desoybcholate Lactose Agar
hz1046 结晶紫中性红胆盐琼脂 (VRBA) 250g 用于大肠菌群的固体平板检测(SN标准)
Violet Red Bile Agar
hz1047 结晶紫中性红胆盐MUG琼脂(VRBA-MUG) 250g 用于大肠菌群和大肠杆菌的固体平板检测(BAM)
Violet Red Bile Agar with MUG
hz1048 MR-VP培养基 250g 用于大肠杆菌的甲基红和VP试验(SN标准)
Methyl Red Voges Proskauer Broth
hz1049 肠道菌计数琼脂 (VRBDA) 250g 用于肠道菌计数和肠杆菌科鉴别
Violet Red Bile Dextrose Agar
hz1050 肠道菌增菌肉汤(EE) 250g 用于肠道菌的增菌培养(GB标准)
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Simmons Citrate Agar
hz1052 麦康凯琼脂 250g 用于革兰氏阴性肠道杆菌的分离
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hz1053 麦康凯琼脂NO3 250g 用于革兰氏阴性肠道杆菌的分离
MacConkey Agar NO3
hz1054 *麦康凯琼脂基础 250g 用于大肠杆菌O157的分离培养(SN标准)
hz1055 Sorbitol Maconkey Agar Base
hz1057 Honda氏产毒肉汤基础 250g 用于致泻大肠埃希氏菌的产毒培养(GB标准)


















