Anti-p-Nitrophenyl Phosphate Disodium,pNPP对硝基苯磷酸二钠
规 格 0.1ml/0.2ml
浓 度 1mg/1ml
性 状 Lyophilized or Liquid
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
Anti-p-Nitrophenyl Phosphate Disodium,pNPP对硝基苯磷酸二钠来源 单抗/Mouse,多抗/Rabbit来源一抗
克隆类型 Monoclonal
交叉反应 Hum,Mouse, Rat, Rabbit, pig(更多详情咨询客服)
产品应用 WB=1:100-1000 ELISA=1:1000-5000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100- 500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
保存条件 Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -2℃ . When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4℃.
免疫组化实验是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。
显色反应(注:二抗一般有两种常用标记酶,HRP和AP,其相对应的显色底物试剂盒为DAB和BCIP/NBT,裂解液一般用发光法。)HRP标记二抗显色, 用DAB KIT(KPL LOT NO YM107 CAT:54-10-00)显色,按顺序依次加Tris Buffer 3滴,DAB Substrate 3滴,Peroxide solution 2滴于5ml蒸馏水中,避光,混匀,将膜加入显色液中避光显色15 min左右终止反应,记录实验结果,将NC膜晾干扫描保存。AKP标记二抗显色,用AKP缓冲液洗膜5min,弃去AP缓冲液,加入显色液(66µlNBT溶液同10mlAKP缓冲液充分混合均匀后加入33µl BCIP溶液1h内使用),室温下显色(37℃可加速反应),显色反应通常在30min内可完成。用20mM EDTA/TBS洗膜终止反应,记录实验结果,将NC膜晾干扫描保存。反应溶液可预先配置,可在4℃储存一年以上。
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