操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
中文名称：HMG-CoA还原酶（HMGCR）抑制剂(Mevastatin)
英文名称：Mevastatin
产品规格：1mL(10mM)|10mg|50mg
产品货号：BJ-01X7854
Mevastatin(Compactin;ML236B)抑制HMG-CoA还原酶（HMGCR），可抑制类异戊二烯的生物合成，阻断蛋白的异戊二烯化，降低血浆水平。 注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！ ：73573-88-3 别名：Compactin;ML236B 纯度：98.56% 分子量：390.51 储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备F-12K培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
丹酚酸D
英文名： Salvianolic acid D
英文别名： (alphaR)-alpha-[[(2E)-3-[2-(Carboxymethyl)-3,4-dihydroxyphenyl]-1-oxo-2-propen-1-yl]oxy]-3,4-dihydroxybenzenepropanoic acid
CAS登录号： 142998-47-8
分子式： C20H18O10
丹酚酸C
英文名： Salvianolic acid C
英文别名： (alphaR)-alpha-[[(2E)-3-[2-(3,4-Dihydroxyphenyl)-7-hydroxy-4-benzofuranyl]-1-oxo-2-propen-1-yl]oxy]-3,4-dihydroxybenzenepropanoic acid
CAS登录号： 115841-09-3
分子式： C26H20O10
三七皂苷R2(R型)
CAS登录号： 新品待定
分子式： C41H69O13
分子量： 871.01
分子结构：
三七皂苷Ft1
CAS登录号： 新品待定
分子式： C47H80O17
分子量： 917.13
分子结构：
苯甲酰次乌头原碱
英文别名： Benzoylhypaconine
CAS登录号： 63238-66-4
分子式： C31H43NO9
分子量： 573.29
次乌头原碱
CAS登录号： 新品待定
分子式： C24H39NO8
分子量： 469.57
分子结构：
新乌头原碱
CAS登录号： 6792-09-2
分子式： C24H39NO9
分子量： 485.57
分子结构：
28-去甲基-β-香树脂酮
CAS登录号： 新品待定
分子式： C29H46O
分子量： 410.67
分子结构：
长春瑞滨
英文名： Vinorelbine
英文别名： 5-Noranhydrovinblastine； NVB；Kw-2307；(2β,3β,4β,5α,12R,19α)-4-(Acetyloxy)-6,7-didehydro-15-[(2R,6R,8S)-4-ethyl-1,3,6,7,8,9-hexahydro-8-(methoxycarbonyl)-2,6-methano-2H-azecino[4,3-b]indol-8-yl]-3-hydroxy-16-methoxy-1-methyl-aspidospermidine-3-carboxylic acid, methyl ester
CAS登录号： 71486-22-1
分子式： C45H54N4O8
长春新碱
英文别名： 22-oxo-vincaleukoblastine
CAS登录号： 57-22-7
分子式： C46H56N4O10
分子量： 824.96
酒石酸长春质碱
英文别名： ;(2alpha,5beta,6alpha,18beta)-3,4-Didehydroibogamine-18-carboxylic acid methyl ester (2R,3R)-2,3-dihydroxybutanedioate
CAS登录号： 4168-17-6
分子式： C25H30N2O8
分子量： 486.51
HMG-CoA还原酶（HMGCR）抑制剂(Mevastatin)线粒体超氧化物染色试剂盒-M13 30T|50T 2 ug pFastBac1-Gus pFastBac1-Gus 低温运输，-20℃保存
内质网染色试剂盒(蓝色荧光) 125T|250T 沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA）（2015药典） Sabouraud Dextrose Agar 250g
高尔基体G01绿色荧光染色试剂盒 30T 1瓶 C6细胞株 C6 低温运输和保存
溶酶体染色试剂盒(绿色荧光)-L01 250T|500T 大肠杆菌／大肠菌群显色培养基(第二代) E.Coli/Coliform Chromogenic Medium 1000(ML)
溶酶体染色试剂盒(红色荧光)-L03 500T|1000T 300U T7 DNA 聚合(未修饰) T7 DNA Polymerase（unmodified） -20℃保存
溶酶体染色试剂盒(黄色/蓝色荧光)-L05 125T|250T 500mL Phosphate Buffer，0.2M, pH6.8 Phosphate Buffer，0.2M, pH6.8 常温保存
细胞质染色试剂盒-C01 500T 0.1mL×10 BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞 BL21 (DE3) pLysS Competent Cell -80℃保存
Ca2+钙离子染色试剂盒(Fluo-3,AM法) 50T|100T 250mL MOPS Buffer,1.0M,pH7.0 MOPS Buffer,1.0M,pH7.0 常温保存
细胞膜染色试剂盒(绿色荧光)-M01 1000T|5000T 1/2MS培养基 1/2MS Medium 250g
细胞膜染色试剂盒(橙色荧光)-M03 1000T|5000T 1瓶 U-2 OS-Luc teT-on细胞株 U-2 OS-Luc teT-on 低温运输和保存
细胞骨架染色试剂盒-C12 500T M-肉汤 M-Broth 250g
