细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备F-12K培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
二． 细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
中文名称：JAK2抑制剂(AZD-1480)
英文名称：AZD-1480
产品规格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
产品货号：BJ-01X7321
英文名称：AZD-1480 产品规格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg AZD-1480是一种新颖的JAK2的ATP竞争性抑制剂，IC50值为0.26nM。 注：本品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他用途！ ：935666-88-9 别名：AZD1480;AZD 1480 纯度：99.37% 分子式：C??H??ClFN? 分子量：348.77 储存条件：-20℃，有效期2年，溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
Fructus viticis蔓荆子染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周DEF1/α Defensin 1/3 防御素α1/3抗体 规格: 0.1ml
Ehrlichia chaffeensis查菲艾利希体（查菲埃立克体）LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周FOXJ1/HFH-4 叉蛋白J1抗体 规格: 0.1ml
Influenza Virus A甲型流感（）病毒N2亚型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Beta galactosidase β半糖苷抗体 0.2ml
Spina gleditsiae皂角刺PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周LRRC4 脑瘤相关基因抗体 规格: 0.2ml
Canine Parainfluenza Virus(CPIV)犬副流感病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CLASP1 细胞连接相关蛋白1抗体 规格: 0.2ml
Infectious Bursa Disease Virus(IBDV)传染性法氏囊病病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周SIPA1 信号诱导增相关蛋白1抗体 规格: 0.2ml
Globicatella sanguinis血球链染料法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Rabbit Anti-mouse IgM/PE-CY5 PE-CY5标记的兔抗小鼠IgM 规格: 0.1ml
石斑鱼源性成分LAMP试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Slit2/Slil3 神经迁移蛋白Slit2/3抗体 规格: 0.1ml
Penicillium citreoviride黄绿青霉LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周KNDC1 脑蛋白9抗体 规格: 0.2ml
Xanthomonas axonopodis pv. betlicola胡椒叶斑病PCR试剂盒 植物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周OAT4L/URAT1 尿酸盐重吸收转运子1抗体 规格: 0.2ml
JAK2抑制剂(AZD-1480)Smo receptor激动剂(SAG)
p38MAPK抑制剂(LY2228820)
Rac GTPase抑制剂
CHK2抑制剂
PARP抑制剂(Veliparib)
deubiquitinase抑制剂
PARPl和PARP2抑制剂
丝裂原活化蛋白激酶抑制剂(MEK162)
mTOR抑制剂(PP 242)
JAK1和JAK2抑制剂(CYT387)
VEGFR多靶点抑制剂(Pazopanib)
