人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
51104 phospho-Androgen Receptor (Ser212) 磷酸化雄激素受体抗体 0.1ml
51105 Amphiregulin 双调蛋白（结肠直肠细胞源性生长因子）抗体 0.1ml
51106 AKR1B1 醛糖还原酶抗体 0.2ml
51107 ARA24 雄激素受体相关蛋白24抗体 0.2ml
51108 phospho-Androgen Receptor(Ser660) 磷酸化雄激素受体抗体 0.1ml
51109 ARC/Arg3.1 ARC抗体 0.1ml
51110 ARF6 ADP核糖基化因子6抗体 0.2ml
51111 Arfaptin 1 ADP核糖基化因子结合蛋白1抗体 0.1ml
51112 mSin3A 同源转录调节蛋白Sin3A抗体 0.2ml
51113 Arfaptin 2 ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体 0.2ml
51114 phospho-arfaptin 2(Ser260) 磷酸化ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体 0.1ml
51115 Arhgef2/GEF H1 Rho鸟苷酸交换因子2抗体 0.2ml
51116 phospho-Arhgef2(Ser810) 磷酸化Rho鸟苷酸交换因子2抗体 0.1ml
51117 Aromatase 芳香化酶抗体 0.1ml
51118 Aromatase 芳香化酶/细胞色素P450/雌激素合成酶抗体 0.1ml
51119 COX1/MTCO1 *氧化酶1抗体 0.2ml
51120 COX7A2 *氧化酶7A2抗体 0.1ml
51121 COX3 *氧化酶亚基3抗体 0.2ml
51122 COX7A2 *氧化酶COX7A2抗体 0.1ml
51123 COX6B *氧化酶亚基6B抗体 0.2ml
51124 Activin A Receptor Type IB 激活素受体1B抗体 0.2ml
51125 ARIP2a 激活素受体2A抗体 0.2ml
51126 Beta-arrestin 1 β-抑制蛋白1抗体 0.2ml
51127 Phospho-beta-Arrestin 1(Ser412) 磷酸化β抑制蛋白1抗体 0.1ml
51128 β-arrestin/ARRB2 β-抑制蛋白2抗体/β休止蛋白2抗体 0.1ml
51129 ARIP2B 激活素受体2B抗体 0.2ml
51130 ARP4 肝血管生成素相关蛋白抗体 0.1ml
51131 ARSA 芳基硫酸酯酶A抗体 0.2ml
51132 Artemin Artemin抗体 0.2ml
51133 ADRA1/ADRA1B/alpha 1 Adrenergic Receptor alpha 1肾上腺素能受体抗体 0.1ml
51134 FAM61B/LSM14B FAM61B蛋白抗体 0.2ml
51135 ESYT1/FAM62A 延伸突触蛋白1抗体 0.2ml
51136 ESYT2/FAM62B 延伸突触蛋白2抗体 0.2ml
51137 FAM63A FAM63A蛋白抗体 0.2ml
51138 RCS1/FAM64A 染色体分离调节蛋白1抗体 0.2ml
51139 FAM70A FAM70A蛋白抗体 0.2ml
51140 FAM71A FAM71A蛋白抗体 0.2ml
51141 FAM71A FAM71A蛋白抗体 0.2ml
51142 FAM83F FAM83F蛋白抗体 0.2ml
51143 NSE1/FAM84A 感觉神经蛋白1抗体 0.2ml
51144 FAM92A1 FAM92A1蛋白抗体 0.2ml
51145 FAM98A FAM98A蛋白抗体 0.2ml
51146 ILDR1 免疫球蛋白样结构域受体1抗体 0.2ml
51147 ILVBL 乙酰乳酸合成酶蛋白抗体 0.2ml
51148 BFSP2/Phakinin 晶状体蛋白2抗体 0.2ml
51149 GFAP delta 胶质纤维酸性蛋白GFAPδ抗体 0.2ml
51150 NPTX2 神经细胞穿透素2抗体 0.2ml
51151 CD276/B7H3 CD276抗体 0.2ml
51152 CRIPT 突触后蛋白CRIPT抗体 0.2ml
51153 DNAH10 轴丝动力蛋白10抗体 0.2ml
51154 DNAH7 轴丝动力蛋白7抗体 0.2ml
51155 DNAI1/Dynein intermediate chain 1 轴丝中链动力蛋白抗体 0.2ml
51156 Gigaxonin 巨轴索神经病蛋白GAN抗体 0.2ml
51157 Kinesin 人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA试剂盒 驱动蛋白KNS1抗体 0.2ml
51158 KIF5A/NKHC1 驱动蛋白KIF5A抗体 0.2ml
51159 MAP1B 微管相关蛋白1B抗体 0.2ml
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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