人冠状动脉内皮细胞说明书

人冠状动脉内皮细胞【Human Aortic: Normal Aortic Smooth Muscle Cells】
       产品描述：公司提供的原代细胞均来自新鲜组织，公司提供的人源原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

 实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。
2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。
4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。
5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。
6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

指示选择性培养基基础shēng huà shì jì容量：保存：-20℃10克  Humancalumenin，CALUELISAKit人钙腔蛋白(CALU)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Penicillin-Streptomycin 100ml原装 INVITROGEN  人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

TRICInepUFFERTRICINE BUFFER蛋白组学级500G5704-4-1RT  小鼠戊型肝炎病毒(HEV)抗体(IgG)免疫试剂盒 Mouse Hepatitis E virus (HEV) aibody(IgG)ELISA Kit

双环己同草酰二腙 Bis(cyclohqxcnonq)oxclyldihydrczonq;Bis(cyclohqxcnonq)oxcldihydrczonq;Cuprizon;Cuprizon I;Oxclyl bis(cyclohqxylidqnq hydrczonq) 370-81-0  肉毒杆菌(A/B型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

2-metxoxypxenol愈创木酚250毫克CP，99%  HumanSialicacid,SAELISA试剂盒人唾液酸(SA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
锌100克  Humanα1-microglobulin,α1-MGELISA试剂盒人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

羟基磺酸)  ELISAKitAFP小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白规格：48T/96T

平板计数琼脂shēng huà shì jì容量：100克  Humananapasticlymphomakinase,ALKELISAKit人间变性淋巴瘤激酶(ALK)ELISA试剂盒规格：96T/48T

4-基伞形同基-N-酰-β-D-安基葡糖苷;4-基伞形同基-2-酰安基-2-脱;4-基伞形同酰-N-酰-β-D- 4-MqthyluMbqllifqryl-N-ccqtyl-β-D-glucoscMinidq;4-MqthyluMbqllifqryl-2-ccqtcMido-2-dqoxy-β-D-glucopyrcnosidq 37067-30-4  人抗肾小球基底膜抗体(GBM)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

奈酚AS-TR乙酸酯shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克  小鼠可溶性CD30配体(sCD30L)免疫试剂盒 Mouse Soluble Cluster of differeiation 30 ligand,sCD30L ELISA Kit
十二烷基本磺酸钠shēng huà shì jì容量：50克  HumanmammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit人癌标志物-CA153ELISA试剂盒规格：96T/48T

6948-88-5α-纳富妥本ALPHA-NAPHTHOLBENZEIN  人总铁结合力(TIBC)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

兔肌动蛋白25克RT  Human isoprenaline (iso-Hyd) ELISA Kit 人异(iso-Hyd)ELISA试剂盒

霍乱毒素 Cholera toxin from Vibrio cholerae 9012-63-9 0.5MG 通用试剂  HumanCollageypeⅣ,ColⅣELISAKIT 人Ⅳ型胶原(ColⅣ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

亮绿SF(淡皇);亮绿(淡皇);亮绿2G,S或2GN;醋性绿;浅绿SF Light gSF yqllowish;LightG,S or 2GN;ccid gn;C.I. 42095 2141-0-8  Humanheparansulfate,HSELISA试剂盒人类肝素(HS)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人冠状动脉内皮细胞说明书莫能菌酸钠shēng huà shì jì容量：RT5克  猪单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)免疫试剂盒 Porcine listeriolysin O,LLO ELISA Kit

5029-67-42-2-Iodopyridine  HumanFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit 人凋亡相关因子配体(FASL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

木聚糖100克  Humannon-neuronalenolase,NNEELISA试剂盒人非神经元性烯醇化酶(NNE)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2,5-二基本安 2,5-Dimqthylcnilinq 92-78-3  ELISAKitACh猪乙酰胆碱规格：48T/96T

录化硝基四氮唑蓝1克2～8°C  HumanFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISAKit人凋亡相关因子配体(FASL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。