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小鼠ELISA试剂盒分子生物学方法

阅读:356发布时间:2014-7-4

这是一类利用细胞因子的基因探针检测特定细胞因子基因表达的技术。目前所有*的细胞因子的基因均已克隆化,故能较容易地得到某一细胞因子的cDNA探针或根据已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探针。利用基因探针检测细胞因子mRNA表达的方法多种多样,常使用斑点杂交、Northern blot、逆转录PCR,细胞或组织原位杂交等。实验的关键在于制备高质量ELISA试剂盒的核酸探针和获得合格的待测物(提取的mRNA样品或细胞/组织标本)。
核酸探针是指一段用放射性同位素或其他标记物标记并与目的基因互补的DNA或单链DNA、RNA。根据其来源可分为cDNA探针、寡核核苷酸探针、基因组基因探针及DNA探针等。小鼠ELISA试剂盒其中cDNA探针和人工合成寡核苷酸探针常用于斑点杂交及Northern blot,而RNA探针因穿透性好更适用于原位杂交。核酸探针技术的应用已经程序化室条件进行选择。生物学检测法比较敏感,又可直接测定生物学功能,是zui可靠的方小鼠ELISA试剂盒法,适用于各种实验目的,是科研部门zui常用的技术,但需要*培养依赖性细胞株,检测耗时长,步骤繁杂,影响因素多,不容易熟练掌握。
免疫学检测法比较简单,迅速,重复性好,但所测定的只代表相应细胞因子的量而不代表活性,同时敏感度也低于生物活性检测法(约低10~100倍)。分子生物学法只能检测基因表达情况,不能直接提供有关因子的浓度及活性等资料,小鼠ELISA试剂盒主要用于机制探讨。在检测细胞因子时,必须考虑到细胞因子的作用具有网络性的特点,人们需明确检测方法所测定的细胞因子成分,并考虑其抑制剂和可溶性受体的水平,将各种结合使用,有可能得到较为可靠的结果。


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