亲和素是一种糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每个分子由4个亚基组成，可以和4个*分子亲密结合。现在使用更多的是从链霉菌中提取的链霉亲和 素。*又称维生素H，分子量244.31，存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物，ELISA试剂盒*-羟 基琥珀亚胺酯(BNHS)可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成*化的产物。亲和素与*的结合，虽不属免疫反应，但特异性强，亲和力大， 两者一经结合就极为稳定。由于1个亲和素分子有4个*分子的结合位置，可以连接更多的*化的分子，形成一种类似晶格的复合体。因此把亲和素和生物 素与ELISA偶联起来，就可大大提高ELISA试剂盒的敏感度。
因此结合于固相的酶标抗原量与ELISA试剂盒受检抗原的量成反比。
(1)将特异抗体与固相载体连接，形成固相抗体。洗涤。
(2) 待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液，使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原，则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原，则 与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合，竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会，使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原，保温 后，酶标抗原与固相抗体的结合可达zui充分的量。洗涤。
(3)加底物显色：参考管中由于结合的酶标抗原zui多，ELISA试剂盒故颜色zui深。参考管颜色深度与待测管颜色深度之差，代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡，表示标本中抗原含量越多。
