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上海纪宁酶联科技有限公司
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*G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
*G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在*G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
42536 倍他环糊精 HPLC法含量测定 常温,避光 100mg 100317-200902
42537 * 含量测定 常温,避光 100mg 10318-200602
42538 *二硫化物 检查用 常温,避光 50mg 10319-200602
42539 * 含量测定 -20℃,避光 30mg 100320-200401
42540 * 含量测定 常温,避光 50mg 100322-200101
42541 * 检查用 常温,避光 100mg 100323-200201
42542 林旦 含量测定 常温,避光 50mg 100324-200001
42543 * HPLC含量测定 常温,避光 100mg 100325-200901
42544 * 含量测定 常温,避光 50mg 100326-200201
42545 联苯苄醇 检查用 常温,避光 50mg 100327-200201
42546 *钠 含量测定 常温,避光 50mg 100330-200101
42547 * 检查用 常温,避光 50mg 100331-201002
42548 * 检查用 常温,避光 50mg 100332-200001
42549 * 含量测定 常温,避光 50mg 100333-200201
42550 * HPLC法含量测定 常温,避光 100mg 100334-200302
42551 * 检查 常温,避光 50mg 100335-200001
42552 * 含量测定 常温,避光 100mg 100336-200703
42553 * 含量测定 常温,避光 100mg 100337-201003
42554 * 含量测定 常温,避光 100mg 100338-200502
42555 *杂质A 检查用 常温,避光 20mg 100339-200602
42556 *杂质B 检查用 常温,避光 20mg 100340-200602
42557 盐酸* 含量测定 常温,避光 100mg 100341-200702
42558 * 含量测定 常温,避光 100mg 100342-200402
42559 盐酸妥拉唑林 含量测定 常温,避光 50mg 100343-200201
42560 盐酸硫利达嗪 鉴别用 常温,避光 50mg 100344-200001
42561 盐酸卡替洛尔 含量测定 常温,避光 75mg 100345-200301
42562 * 含量测定 常温,避光 100mg 100347-200702
42563 7-甲氧基-4’-羟基异黄酮 有关物质 常温,避光 20mg 100348-200301
42564 * 含量测定 常温,避光 100mg 100349-200501
42565 * 含量测定 常温,避光 100mg 100350-200501
42566 * 含量测定 常温,避光 50mg 100352-200301
42567 * 含量测定 常温,避光 50mg 100353-200301
42568 *占替诺 含量测定 常温,避光 100mg 100356-201002
42569 盐酸* HPLC法含量测定 常温,避光 100mg 100357-200301
42570 卡巴* UV法含量测定 常温,避光 30mg 100361-200301
42571 * 含量测定 常温,避光 100mg 100363-200301
42572 * 含量测定 常温,避光 50mg 100364-200301
42573 * 含量测定 常温,避光 100mg 100365-200401
42574 卡洛磺钠 含量测定 常温,避光 100mg 100366-200702
42575 * 含量测定 2-8℃,避光 100mg 100367-201003
42576 *2 HPLC法含量测定 常温,避光 100mg 100369-200502
42577 * HPLC法含量测定 常温,避光 50mg 100370-200301
42578 * 含量测定 常温,避光 100mg 100373-200502
42579 苯磺酸* 含量测定 常温,避光 100mg 100374-200903
42580 * 含量测定 常温,避光 100mg 100375-200502
42581 氯化钠 含量测定 常温,避光 100mg 100376-201001
42582 * UV法含量测定 常温,避光 100mg 100379-200501
42583 * 含量测定 常温,避光 50mg 100380-200301
42584 * 检查用 常温,避光 50mg 100381-200301
42585 * 含量测定 2-8℃,避光 0.5ml 100384-200501
42586 * 含量测定 常温,避光 100mg 100386-200702
42587 呋咱甲氢龙 含量测定 常温,避光 50mg 100387-200401
42588 夫拉扎勃 含量测定 常温,避光 50mg 100387-200401
42589 * 含量测定 常温,避光 100mg 100388-200401
42590 * 含量测定 常温,避光 50mg 100389-200301
42591 *1 含量测定 常温,避光 100mg 100390- 200502
42592 *T 含量测定 常温,避光*G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA试剂盒 100mg
42593 * 含量测定 常温,避光 100mg 100394-200401
42594 丹蒽醌 含量测定 常温,避光 100mg 100398-200701
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5*G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA试剂盒显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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