人内毒素(ET)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在人内毒素(ET)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。
33559 人S100B蛋白(S-100B)ELISA试剂盒 Human Soluble protein-100B，S-100B ELISA Kit 96T/48T
33560 人β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒 human Beta-Endorphin，β-EP ELISA Kit 96T/48T
33561 人原钙黏素1(PCDH1)ELISA试剂盒 Human protocadherin 1,PCDH1 ELISA Kit 96T/48T
33562 人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)ELISA试剂盒 Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK ELISA Kit 96T/48T
33563 人胸肾表达趋化因子(BRAK/CXCL14)ELISA试剂盒 Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK ELISA Kit 96T/48T
33564 人B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA试剂盒 Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1 ELISA Kit 96T/48T
33565 人结缔组织活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA试剂盒 Human connective tissue-activating peptide Ⅲ,CTAPⅢ ELISA Kit 96T/48T
33566 *A Fc段受体Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA试剂盒 Human Receptor Ⅰ for the Fc region of immunoglobulin A,FcαRⅠ ELISA Kit 96T/48T
33567 *E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA试剂盒 Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin E,FcεRⅡ ELISA Kit 96T/48T
33568 *G Fc段受体Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA试剂盒 Human Receptor Ⅲ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅢ ELISA Kit 96T/48T
33569 *G Fc段受体Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA试剂盒 Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅡ ELISA Kit 96T/48T
33570 *G Fc段受体Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA试剂盒 Human ReceptorⅠfor the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅠ ELISA Kit 96T/48T
33571 人粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA试剂盒 Human granulocyte chemotactic protein-2,GCP-2 ELISA Kit 96T/48T
33572 人ω干扰素(IFN-ω/IFNB)ELISA试剂盒 Human Interferon ω,IFN-ω ELISA Kit 96T/48T
33573 人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA试剂盒 Human glycosylation-dependent cell adhesion molecule-1,GlyCAM-1 ELISA Kit 96T/48T
33574 人干扰素调节因子(IRF)ELISA试剂盒 Human interferon Regulatory Factor,IRF ELISA Kit 96T/48T
33575 人淋巴毒素β(LTB)ELISA试剂盒 Human lymphotoxinβ,LTB ELISA Kit 96T/48T
33576 人淋巴毒素α(LTA)ELISA试剂盒 Human lymphotoxinα,LTA ELISA Kit 96T/48T
33577 人CC趋化因子受体1(CCR1)ELISA试剂盒 Human CC-chemokine receptor 1,CCR1 ELISA Kit 96T/48T
33578 人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA试剂盒 Human CX3C-chemokine receptor 1,CX3CR1 ELISA Kit 96T/48T
33579 人肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)ELISA试剂盒 Human pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA Kit 96T/48T
33580 人黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA试剂盒 Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1,MAdCAM-1 ELISA Kit 96T/48T
33581 人可溶性CD38(sCD38)ELISA试剂盒 Human Soluble Cluster of differentiation 38,sCD38 ELISA Kit 96T/48T
33582 人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA试剂盒 Human Soluble Cluster of differentiation 21,sCD21 ELISA Kit 96T/48T
33583 人可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒 Human Leptin Soluble Receptor,sLR ELISA Kit 96T/48T
33584 人Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒 Human Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit 96T/48T
33585 人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒 Human monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA Kit 96T/48T
33586 人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白(N-Cad)ELISA试剂盒 Human Neural-Cadherin, N-Cad ELISA Kit 96T/48T
33587 人肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)ELISA试剂盒 Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor,HB-EGF ELISA Kit 96T/48T
33588 人红细胞刺激因子(ESF)ELISA试剂盒 Human erythropoiesis stimulating factor,ESF ELISA Kit 96T/48T
33589 人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE)ELISA试剂盒 Human TNF related activation induced cytokine,TRANCE ELISA Kit 96T/48T
33590 人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA试剂盒 Human Epithelial Cell Adhesion Molecule,Ep-CAM ELISA Kit 96T/48T
33591 人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒 Human Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AmAC-1 ELISA Kit 96T/48T
33592 人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA试剂盒 Human soluble vascular 人内毒素(ET)ELISA试剂盒endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2/sFLK-1 ELISA Kit 96T/48T
33593 人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒 Human thymic stromal lymphopoietin,TSLP ELISA Kit 96T/48T
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*；
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法：
1) 贴封片或加盖；
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5人内毒素(ET)ELISA试剂盒显色：可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法：
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流；
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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