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上海纪宁酶联科技有限公司
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蓝耳病ELISA试剂盒,ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在酶联免疫实验得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
蓝耳病ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在蓝耳病ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给客户带来一些启发,提高试验质量。
14899 斜方蛋白1(RHOM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Rhombotin 1 (RHOM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14900 核糖核酸外切酶1(ERI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Exoribonuclease 1 (ERI1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14901 核糖核酸酶K(RNASEK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease K (RNASEK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14902 5'-3'外切核糖核酸酶1(XRN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for 5'-3'Exoribonuclease 1 (XRN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14903 5'-3'外切核糖核酸酶2(XRN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for 5'-3'Exoribonuclease 2 (XRN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14904 核糖核酸酶A2(RNASE2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease A2 (RNASE2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14905 泛素C(UBC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquitin C (UBC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14906 干扰素ε(IFNε)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Epsilon (IFNe) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14907 干扰素κ(IFNκ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interferon Kappa (IFNk) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14908 对氧磷酶2(PON2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Paraoxonase 2 (PON2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14909 核连蛋白1(NUCB1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleobindin 1 (NUCB1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14910 核连蛋白2(NUCB2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleobindin 2 (NUCB2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14911 速激肽4(TAC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tachykinin 4 (TAC4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14912 粘蛋白21(MUC21)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Mucin 21 (MUC21) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14913 蔗糖酶异麦芽糖酶(SI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Sucrase Isomaltase (SI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14914 核糖核酸酶A4(RNASE4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease A4 (RNASE4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14915 核糖核酸酶A8(RNASE8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease A8 (RNASE8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14916 核糖核酸酶A6(RNASE6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease A6 (RNASE6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14917 核糖核酸酶A7(RNASE7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonuclease A7 (RNASE7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14918 转运蛋白2(TNPO2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transportin 2 (TNPO2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14919 桥粒芯糖蛋白4(DSG4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Desmoglein 4 (DSG4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14920 胸腺旁腺素(PTMS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Parathymosin (PTMS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14921 单酰甘油脂肪酶(MGL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Lipase, Monoacylglycerol (MGL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14922 角蛋白6A(KRT6A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Keratin 6A (KRT6A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14923 失调蛋白10(ATXN10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ataxin 10 (ATXN10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14924 失调蛋白7(ATXN7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ataxin 7 (ATXN7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14925 失调蛋白3(ATXN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ataxin 3 (ATXN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14926 线粒体铁蛋白(FTMT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ferritin, Mitochondrial (FTMT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14927 饥饿素/肥胖抑制素前激素原(GHRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ghrelin/Obestatin Preprohormone (GHRL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14928 胃动素受体(MLNR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Motilin Receptor (MLNR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14929 细胞周期素A(CCNA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclin A (CCNA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14930 细胞周期素A1(CCNA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclin A1 (CCNA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14931 细胞周期素B(CCNB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclin B (CCNB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14932 细胞周期素B2(CCNB2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclin B2 (CCNB2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14933 细胞周期素B3(CCNB3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cyclin B3 (CCNB3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1 选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样:可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒*混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2) 加样后及时放入孵箱。
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5) 标本较多时,请分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。
2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;洗板不畅,导致洗板效果差。
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;
2) 合理安排,或多用几台洗板机。
5显色:可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:
1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流;
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止:可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板:如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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