裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白（AFP）ELISA试剂盒

裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒实验ELISA结果判定常用的几种方法：
1)目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照；与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。
3)以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性；P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑；P／N小于1．5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
我们将在裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给客户带来一些启发，提高试验质量。

11225 酸性磷酸酶1(ACP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Acid Phosphatase 1 (ACP1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11226 角蛋白8(KRT8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Keratin 8 (KRT8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11227 生长分化因子15(GDF15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11228 白介素8(IL8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 8 (IL8) 48T/96T Chicken (Gallus)
11229 生长分化因子15(GDF15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11230 生长分化因子15(GDF15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 15 (GDF15) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11231 金属硫蛋白3(MT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Metallothionein 3 (MT3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11232 纤维蛋白原降解产物(FDP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibrinogen Degradation Product (FDP) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11233 骨钙素(OC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Osteocalcin (OC) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11234 补体成分5(C5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 5 (C5) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11235 S100钙结合蛋白A7(S100A7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A7 (S100A7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11236 转铁蛋白(TRF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Transferrin (TRF) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11237 *ⅩⅢB肽(F13B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor XIII B Polypeptide (F13B) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11238 脑钠素(BNP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Brain Natriuretic Peptide (BNP) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11239 三磷酸肌醇(IP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Inositol Triphosphate (IP3) 48T/96T General
11240 肿瘤坏死因子β(TNFβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Beta (TNFb) 48T/96T Chicken (Gallus)
11241 免疫球蛋白A(IgA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Immunoglobulin A (IgA) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11242 磷脂酰肌醇特异性磷酯酶Cβ1(PLCβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipase C Beta 1, Phosphoinositide Specific (PLCb1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11243 二酰基甘油(DAG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Diacylglycerol (DAG) 48T/96T General
11244 白介素18(IL18)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 18 (IL18) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11245 肥胖抑制素(OB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Obestatin (OB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11246 葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucose Transporter 2 (GLUT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11247 葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucose Transporter 2 (GLUT2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11248 过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Delta (PPARd) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11249 法尼酯X受体(FXR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Farnesoid X Receptor (FXR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11250 维甲酸X受体α(RXRα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Retinoid X Receptor Alpha (RXRa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11251 肝X受体α(LXRα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Liver X Receptor Alpha (LXRa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11252 蛋白激酶Cδ(PKCδ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Kinase C Delta (PKCd) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11253 铁调素(Hepc)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Hepcidin (Hepc) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11254 葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Glucose Transporter 4 (GLUT4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11255 抗存活素抗体(Anti-Surv)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Anti-Survivin Antibody (Anti-Surv) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11256 胎儿肾钙黏蛋白(KCAD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cadherin, Fetal Kidney (KCAD) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11257 Ki-67蛋白(Ki67P)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ki-67 Protein (Ki67P) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11258 S100钙结合蛋白P(S100P)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein P (S100P) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11259 磷脂酰肌醇特异性磷酯酶Cβ1(PLCβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholipase C Beta 1, Phosphoinositide Specific (PLCb1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11260 肌球蛋白轻链激酶(MYLK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin Light Chain Kinase (MYLK) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11261 类*(TPS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tryptase (TPS) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11262 类*(TPS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tryptase (TPS) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11263 CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for CCAAT/Enhancer Binding Protein Beta (CEBPb) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11264 肝素结合性表皮生长因子(HBEGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Heparin Binding Epidermal Growth Factor Like Growth Factor (HBEGF) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11265 *结合蛋白(DBP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vitamin D Binding Protein (DBP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11266 表皮生长因子受体2(EGFR2)裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Epidermal Growth Factor Receptor 2 (EGFR2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11267 肌球蛋白重链2(MYH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 2, Skeletal Muscle, Adult (MYH2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)

下面我们分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法：
1 选择试剂：选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
2 加样：可能原因： 
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样； 
2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法： 
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒*混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 
2) 加样后及时放入孵箱。 
3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 
5) 标本较多时，请分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 
2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。解决办法： 
1) 贴封片或加盖； 
2) 按说明步骤严格控制操作时间。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 
2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。 
3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法： 
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 
2) 合理安排，或多用几台洗板机。
5裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒显色：可能原因： 
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 
2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法： 
1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 2) 加样时保持显色剂不外流； 
3) A、B液应避免接触金属器械。
6 终止：可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
7 读板：如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。
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