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ELISA试剂盒使用的关键要点

阅读:72发布时间:2020-2-17

ELISA试剂盒的运用关键:
1、依照阐明书中标明的时刻、加液的量及次序进行温育操作。
2、运用洁净的塑料容器装备洗涤液。运用前充沛混匀试剂盒里的各种成份及样品。
3、试剂应按标签阐明书贮存,运用前康复到室温。稀稀往后的规范品应丢掉,不可保存。
4、标本因为冷藏时Ig G聚组成多聚体,Fib非特异性吸附,重复冻融机械切力致使蛋白分子受损。
5、试验中不必的板条应立即放回包装袋中,密封保存,防止蜕变。
6、运用一次性的吸头防止穿插污染,吸取停止液和底物A、B液时,防止运用带金属部分的加样器。
7、加样时禁绝,枪头吸样时插入样本液面下2mm为宜。
8、不必的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前运用。
9、参加试剂的次序应共同,以确保一切反响板孔温育的时刻相同。
10、应该注意试剂4°c冷藏时水化层构成,蛋白分子分布反常。
11、底物A应挥发,防止长时刻翻开盖子。ELISA试剂盒底物B对光灵敏,防止长时刻露出于光下。防止用手触摸,有毒。试验完成后应立即读取OD值。
12、常选用的温度有43、37°c、室温、或许4°c等。37°c较常用,4°c作用较好,但孵育时刻有异。
13、要注意内源如风湿因子,补体,高浓度非特异性免疫球蛋白,异嗜性抗体及某些自身抗体等;外源如标本溶血,细菌污染,贮存时刻过长及凝结等要素影响。
14、洗涤酶标板时应充沛拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反响孔中吸水。
15、在运用ELISA试剂盒时应注意:2-8℃保存(特殊情况在外)、同一种类不同批号试剂不能混用、不同种类试剂盒显色剂不能混用。


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