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怎样避免在培育中胎牛血清黑点生成

阅读:120发布时间:2019-12-26

(1) 尽可能地减少血清冻融次数。

(2) 培育基无需37℃水浴。

(3) 培育基保持zuiPH 值7.0-7.2。

(4) 严格控制制造培育基的水质,容器定期刷洗。

(5) 掌握细胞传代的zui机遇,细胞切勿生长过老。

一、化冻   
将血清从-20 度冰箱中取出,室温(或浸于自来水中)化冻(约需求30分钟至2小时,也可放于4度冰箱化冻过夜;化冻后若不马上灭活,可以放入4度冰箱中暂时保存)

二、灭活   
(1)放入室温的水浴锅内开端加热(一起放入一个空的血清瓶,内装100ml自来水,插入一根温度计,温度监控以此为准)

(2)当温度计显示56度时,停止加热,改为连续加热,保持56度(±0.5度)30分钟(±3分钟;若不小心使温度上升超过56度,则:若仍未超过60度,且时间很短,比如不超过5分钟,则仍可运用;若超过60度,或许时间较长,则弃去不用,或许测验用于一些一般细胞的培育)

(3)取出,天然冷却至室温(约需1-3小时),可分装或-20度继续冻存。

三、分装   
(1)转入无菌间,在超净台内将血清分装入10ml离心管中(留意预先要将血清轻轻摇动数周、混匀;用吸液管或吹大管吹出血清时要留意:不要吹出气泡(血清很粘稠,很简单产生气泡;假如产生气泡, 则在酒精灯火焰上过一下)。

(2)放入-20 度冰箱冻存。

(3)全部操作约需求4-6小时。


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