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上海通蔚实业有限公司
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阅读:78发布时间:2019-11-21
1.一次ELISA实验需求多长时间?
双抗体夹心ELISA法一次实验需求3.5-4小时,竞争ELISA法一次实验需求2-2.5小时。
2.用什么软件处理ELISA检测的数据比较好?
ELISA规范曲线拟合能够运用Curve Expert软件进行数据分析。它运用十分方便,能够生成漂亮的曲线运用到论文之中。软件能够在下载中心进行下载。
3.血浆样本怎么处理?
建议选择EDTA或许柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,于1000×g离心15分钟,细心搜集上清。保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
4.细胞上清液样本怎么处理?
检测分泌性的成份时,用无菌管搜集。离心20分钟左右(1000×g)。细心搜集上清。
5.血清样本怎么处理?
全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟。细心搜集上清。保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
6.为什么有的试剂盒是采用竞争ELISA法?
小分子抗原或半抗原由于缺少可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,能够采用竞争法。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争*化抗体上的结合位点,标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的*化抗体愈少,*后的显色也愈浅,即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。小分子激素等ELISA测定多用此法。
7.细胞裂解液样本怎么处理?
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过重复冻融或许超声破碎,以使细胞损坏并放出细胞内成份。离心10分钟左右(5000×g)。细心搜集上清。保存过程中如有沉积构成,应再次离心。
8.安排样本怎么处理?
用预冷的PSB (0.01M,pH=7.4)冲刷安排,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量成果),称重后将安排剪碎。将剪碎的安排与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的安排样本对应9mL的PBS,详细体积可根据实验需求适当调整,并做好记载。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解安排细胞,能够对匀浆液进行超声破碎,或重复冻融。后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟,取上清检测。
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