ELISA试验操作所要求的条件是比较严厉的，无论是对试验的硬件条件仍是对试验的操作人员的技能要求，都是如此。下面所说到的便是一些在进行ELISA试验时所要留意的一些问题。
ELISA试验18条通用规矩：
1.要确保移液枪的性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但zuei好有专业人员进行纠正。
2.要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。汲取不同的液体后，要更换枪头。即使是汲取规范品时。
3.要在试验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使成果更安稳。
4.试验时，要使底物避光保存。
5.用枪汲取液体时速度不能太快，避免产生气泡而使汲取量不。
6.汲取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
7.将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体触摸，可使枪头上的液滴和孔壁触摸，液滴会自然流下去。
8.液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功用。
9.温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，避免水分的蒸腾。
10.洗板时，每次洗液参加后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
11.洗液不够时，可用蒸馏水自行制造PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，参加0.1%的吐温20作为洗液。参加1/1000的叠氮钠后可长时刻保存。
12.底物是光灵敏的，要在临用前现配。
13.检测前，要翻开酶标仪，使之安稳10分钟以上。
14.底物有必定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免触摸。
15.待检样品要澄清，否则会影响成果。
16.温浴时刻应遵守试剂盒规则。
17.应尽量做双孔试验，这样才干确保数据的性。
18.对成果有疑问的样品要用其它办法进行确证。
