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货号 | FS-01S63375 |
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商品介绍:
测定意义
NO(Nitric Oxide,NO)广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中,特别是神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质,发挥信号传递的作用,是一种新型的生物信使分子,在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。
测定原理:
NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2—,在酸性条件下,NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在550nm处有特征吸收峰,测定其吸光值,可以计算NO含量。为了排除样品色素等的影响,每个样品需做对照管。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
NO含量检测试剂盒可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | FS-01S63375 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
甲胎蛋白(αFP)联免疫试剂盒 多形布勒担子酵母Rat CTXⅢ( Cross-linked C-Telopeptides Of Type Ⅲ Collagen) ELISA Kit
性成纤维生长因子(AFGF/FGF1)联免疫试剂盒香菇(L988)Rat CRY1 (Cryptochrome 1) ELISA Kit
铁调(Hepc)联免疫试剂盒地衣芽孢杆Rat CLEC2C (C-Type Lectin Domain Family 2 Member C) ELISA Kit
粒集落激因子(G-CSF)联免疫试剂盒盘长孢状盘孢Rat CNP (C-Type Natriuretic Peptide)ELISA Kit
肝生长因子(HGF)联免疫试剂盒 蜡蚧Rat CTACK (Cutaneous T-Cell Attracting Chemokine) ELISA Kit
β干扰(IFN-β)联免疫试剂盒IBV M41 HAR/HI serum 阳性血清(荷兰引进)Rat CXCR3 (CXC-Chemokine Receptor 3) ELISA Kit
胰岛样生长因子1(IGF-1)联免疫试剂盒 间型串珠镰孢Rat TPS (Tryptase) ELISA Kit
白介1α(IL-1α)联免疫试剂盒昆明链霉Rat CREB (Cyclic AMP Response Element Binding Protein) ELISA Kit
白介2(IL-2)联免疫试剂盒苏云金芽孢杆苏云金亚种Rat CDK5( Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit
白介4(IL-4)联免疫试剂盒根瘤Rat CDK9 (Cyclin Dependent Kinase 9) ELISA Kit
白介6(IL-6)联免疫试剂盒唐菖蒲青霉Rat CDKN2A (Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 2A) ELISA Kit
白介10(IL-10)联免疫试剂盒冷变紫薄层Rat CCND1 (Cyclin D1) ELISA Kit
白介17(IL-17)联免疫试剂盒粉红单端孢霉Rat CCND2 (Cyclin D2) ELISA Kit
γ干扰(IFN-γ)联免疫试剂盒就地堆肥地芽孢杆Rat CCND3 (Cyclin D3) ELISA Kit
肿瘤坏死因子α(TNF-α)联免疫试剂盒克鲁维毕赤酵母克鲁维变种Rat CYPA (Cyclophilin A) ELISA Kit
NO含量检测试剂盒可见分光光度法原癌基因CBL2抗体Human GCSFR(Colony Stimulating Factor Receptor, Granulocyte) ELISA Kit兔载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒,
磷化原癌基因CBL2抗体Human GDF3(Growth Differentiation Factor 3) ELISA Kit兔子胰岛样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒,
β链接相互作用蛋白1抗体Human fT3(Free Triiodothyronine) ELISA Kit前列腺F(PGF)ELISA试剂盒--动物,人
磷化β链接相互作用蛋白1抗体Human GDF6(Growth Differentiation Factor 6) ELISA Kit宝石橙蛋白染色试剂
磷化β 连环蛋白抗体Human GDH/GLDH(Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit三氧化锑
叶绿体蛋白抗体(植物)Human GDF7(Growth Differentiation Factor 7) ELISA Kit铱海棉
磷化后期促进复合蛋白3抗体Human fT4(Free Thyroxine) ELISA Kit人抗肺泡基底膜抗体(ABM-Ab)ELISA试剂盒, ABM-Ab ELISA kit
磷化丝切蛋白抗体Human FGα(Fibrinogen Alpha) ELISA Kit人组织蛋白K(cath-K)ELISA试剂盒, cath-K ELISA
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