当前位置:上海抚生实业有限公司>>生化检测试剂盒>>氨基酸代谢系列>> CSL半胱氨酰亚砜裂解酶检测试剂盒微量法
货号 | FS-01S63414 |
---|
商品介绍:
测定意义
半胱氨酰亚砜裂解酶(CSL)广泛存在于百合科葱属(如大蒜和洋葱),十字花科芸薹属
(如卷心菜,菜花,西兰花),以及豆科中的合金欢属中,并通常被称为蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰转肽酶和半胱氨亚砜裂解酶的作用下转化成香菇精,以及产生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是内源性甲醛生成的关键酶之一,测定CSL活性对于研究食品安全具有重要意义。
测定原理
CSL催化S-甲基-L-半胱氨亚砜反应产生丙酮酸,与2,4-二硝基肼反应,在碱性条件下显棕红色,在510nm下有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、离心机、分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅、蒸馏水。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
CSL半胱氨酰亚砜裂解酶检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/48样 | FS-01S63414 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
甘油-3-磷酰基转移大鼠皮质酮/肾上腺酮glycerol-3-phosphate O-acyltransferase
脂肪腮腺炎病IgMLipase
肉棕榈酰基转移大鼠内皮1carnitine palmitoyltransterase
脂肪转运蛋白腮腺炎病IgGfatty acid transport protein
脂肪脱饱和大鼠血管舒缓激肽fatty acid desaturase
葡萄糖激EB病IgMGlucokinase
胰岛大鼠抵抗Insulin
酰基A氧化EB病IgAAcyl-CoA Oxidase
甲酰磷合成1大鼠催乳carbamoyl phosphate synthase 1
甲酰磷合成1大鼠促生长释放carbamoyl phosphate synthase 1
丙羟化EB病IgGphenylalanine hydroxylase
甘油-3-磷酰基转移利什曼原虫抗体glycerol-3-phosphate O-acyltransferase
脂肪转运蛋白大鼠促肾上腺皮质fatty acid transport protein
脂肪脱饱和大鼠促卵泡fatty acid desaturase
葡萄糖激登革热抗体Glucokinase
CSL半胱氨酰亚砜裂解酶检测试剂盒微量法荧光APC标记鸡IgGAnti-IL17B Antibody小鼠突触体相关蛋白25(SNAP-25) elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记鸡IgMAnti-IL17F Antibody小鼠凝血受体(TR)elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记狗IgGAnti-IL18R1 Antibody小鼠Agouti相关蛋白(AgRP)elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记狗IgMAnti-IL18 Antibody小鼠突触(SYP)elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记羊IgMAnti-IL18RAP Antibody小鼠硫氧化还原蛋白(Trx)elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记豚鼠IgGAnti-IL19 Antibody小鼠转膜含Emp24结构域蛋白1(TMED1)elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记豚鼠IgMAnti-IL1B Antibody小鼠血管内皮生长因子受体3(VEGFR3/Flt4)elisa定量检测试剂盒
荧光APC标记马IgGAnti-IL1A Antibody小鼠内皮蛋白C受体(EPCR)elisa定量检测试剂盒
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,智慧城市网对此不承担任何保证责任。
温馨提示:为规避购买风险,建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。