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货号 | FS-01S63551 |
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商品介绍:
测定意义
肉毒碱棕榈酰转移酶是存在于线粒体内膜的一类酰基转移酶。可逆地催化从酰基辅酶将酰基转移至L-肉毒碱的反应,在转运脂肪酸通过线粒体内膜的过程中起重要作用。
测定原理:
基于肉碱和脂酰辅酶在丙二酰辅酶存在与否的条件下,通过肉碱脂酰转移酶(CPT-I)的作用,产生脂酰肉碱,并释放出巯基辅酶(COA-SH),与Ellman试剂DN-TB反应后,产生黄色的TNB。通过其吸收峰值得变化(412nm),来定量分析CPT-1的活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
CPT1肉毒碱棕榈酰转移酶检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | FS-01S63551 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
鸡IV型胶原(COL4)试剂盒Anti-ATP5MC3 Antibody基质金属蛋白-3(抗原)
鸡中性粒激活蛋白3(NAP3)试剂盒Anti-ATP5MF Antibody基质金属蛋白-7(抗原)
鸡肝脂 (LIPC)试剂盒Anti-ATP5ME Antibody金属基质蛋白-14
鸡生长因子受体结合蛋白10(Grb10)试剂盒Anti-ATP5MGL AntibodyGDNF家族受体α-1(抗原)
鸡间羟肾上腺(MN)试剂盒 Anti-ATP6V0D1 Antibody血管紧张II抗原
鸡双肾上腺皮质样激1(DCLK1)试剂盒Anti-ATP6V1C2 Antibody葡萄糖转运蛋白2(抗原)
鸡白介12 p40(IL-12 p40)试剂盒Anti-ATP6V1H Antibody心钠肽(心钠)抗原
鸡血管活性肽抑制剂(VPI)试剂盒 Anti-ATP6V1B1 AntibodyGDNF家族受体α-4(抗原)
鸡硫氧化还原蛋白(Trx)试剂盒Anti-ATP5PB Antibody生长释放(因子)(抗原)
鸡血管紧张原(AGT)试剂盒 Anti-ATP5MPL Antibody血管位蛋白样1/血管生成样蛋白-1抗原
鸡蛋白Z(PROZ)试剂盒Anti-ATP6V1H Antibody葡萄糖转运蛋白4(抗原)
鸡蛋白磷1调控亚基1A(PPP1R1A)试剂盒Anti-ATPAF2 Antibody胃泌抑制肽(抗原)
鸡STAT蛋白抑制因子3(PIAS3)试剂盒 Anti-ATR Antibody血管位蛋白样2/血管生成样蛋白-2(多肽)
鸡蛋白二硫化物异构A6(PDIA6)试剂盒Anti-ATRIP Antibody胰高血糖样肽-2(多肽抗原)
鸡腺苷三磷结合盒转运体A1(ABCA1)试剂盒 Anti-ATRX Antibody94kDa 糖调节蛋白(抗原)
CPT1肉毒碱棕榈酰转移酶检测试剂盒微量法依兰依兰油 特级10-溴癸 97%Anti-Glasses Snake poison Protein/FITC 荧光标记抗眼镜蛇蛇蛋白抗体(眼镜蛇)IgG
甲基环氧烷 97%N,N'-二基对二 95%Anti-GLI1/FITC 荧光标记下游转录因子Gli1蛋白抗体IgG
甲基烯磺钠 99%邻二甲二丁酯 >98.5%(GC)Anti-GLP-1(7-36)/FITC 荧光标记兔抗胰高血糖样肽-1抗体IgG
甲代烯基 99%癸二二丁酯 98%Anti-GLP-1/KG-31 /FITC 荧光标记胰高血糖样肽-1抗体IgG
乙酰肼 98%聚乙烯缩丁 M.W.170,000-250,000Anti-GLP-2/FITC 荧光标记胰高血糖样肽-2抗体IgG
茜黄R Indicator无水四钠 anhydrous, ≥99%Anti-GLP-2/FITC 荧光标记胰高血糖样肽-2抗体IgG
4-基安替吡啉 98%叔丁基二茂铁 95%Anti-Glu-Glu Tag/FITC 荧光标记兔抗Glu-Glu Tag标签抗体IgG
茜络合指示剂 Indicator2-溴-4-氯甲 98%Anti-GLUR2/FITC 荧光标记谷受体2抗体IgG
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