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货号 | FS-01S63603 |
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商品介绍:
测定意义
海藻糖是功能性低聚糖,具有非还原性、保湿性、热酸稳定性、抗冻结性等特性,是细胞在不良环境条件下产生的一种重要的抗逆应激物之一,它对生物大分子和生物体组织有着非特异性的保护作用。海藻糖合成酶(Trehalose Synthase)催化麦芽糖合成海藻糖,是海藻糖生物合成的关键途径之一。
测定原理:
TS催化麦芽糖产生海藻糖,使用糖化酶分解剩余麦芽糖为葡萄糖,通过葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量,按照麦芽糖减少的量表示海藻糖合酶活性。
需自备的仪器和用品:
分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
TPP海藻糖6磷酸酯酶检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/48样 | FS-01S63603 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
猪载脂蛋白C3(ApoC3)联免疫试剂盒 LuteolibacterPdx1 (D59H3) XP® Rabbit mAb
猪血管紧张II (ANG II)联免疫试剂盒 小叶相思根瘤Pdx1 (D59H3) XP® Rabbit mAb
猪肾小球组织糖基化终末产物(GTEAGE)联免疫试剂盒 类诺卡氏属IWS1 Antibody
猪N-乙酰β-D-基葡萄糖苷(NAGase)联免疫试剂盒梭属MEF2D Antibody
猪解整合金属蛋白10(ADAM10)联免疫试剂盒 苏云金芽胞杆亚亚种HSP60 (D6F1) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
猪脱氧核糖核I(DNase-I)联免疫试剂盒 丛毛红曲PERK (D11A8) Rabbit mAb
猪Ⅲ型胶原(COL3)联免疫试剂盒 东方伊萨酵母PERK (D11A8) Rabbit mAb
猪雷帕霉靶蛋白(mTOR)联免疫试剂盒 酿酒酵母EAAT1 (D44E2) XP® Rabbit mAb
猪促睡眠肽α(δSIP-α)联免疫试剂盒 蜡样芽孢杆EAAT1 (D44E2) XP® Rabbit mAb
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猪CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)联免疫试剂盒 淡紫青霉EAAT1 (D20D5) Rabbit mAb
猪C型钠尿肽(CNP)联免疫试剂盒 印度芽孢杆PPP2R4 (5G3) Mouse mAb
猪普列克底物蛋白同源物样结构域家族A成员2(PHLDA2)联免疫试剂盒洋葱伯克霍尔德氏PPP2R5D (H5D12) Mouse mAb
猪粘蛋白5B(MUC5B)联免疫试剂盒绒毛栓PPP2R2A (2G9) Mouse mAb
猪XV 型胶原(COL15)联免疫试剂盒 酮丁梭PPP2R2A (2G9) Mouse mAb
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