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货号 | FS-01S63810 |
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产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
ACK乙酸激酶检测试剂盒紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | FS-01S63810 |
商品介绍:
测定意义
ACK主要存在于微生物中,催化乙酸和ATP生成乙酰磷酸和ADP,是细菌碳代谢和能量代谢的关键酶,尤其是在古细菌甲烷合成代谢中起着中枢作用。
测定原理:
(1)ACK催化乙酸钠和ATP生成乙酰磷酸和ADP,(2)丙酮酸激酶催化ADP和PEP生成ATP和丙酮酸,(3)乳酸脱氢酶催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD+,(4)在340nm下测定NADH氧化生成NAD+速率,即可反映ACK活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水
产品内容:
公司产品仅用于科研酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
下列是公司正在热销的产品:
猪膀胱肿瘤抗原(BTA)试剂盒 Human ZNF740 ELISA Kit生长抑制基因39蛋白抗体
猪大脑糖原磷化(PYGB)试剂盒Human ZNF74 ELISA Kit磷神经膜抗体
猪染色质区解旋DNA结合蛋白5(CHD5)试剂盒Human ZRANB2 ELISA Kit脆性X相关蛋白1抗体
猪Toll样受体2(TLR2)试剂盒Human ZNF746 ELISA KitF-box蛋白家族FBXO31抗体
猪微量转铁蛋白(MTF)试剂盒Human ZRANB3 ELISA Kit卵巢滤泡抗体(BHD综合征)
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猪喋呤(MTX)试剂盒 Human ZNF774 ELISA Kit脂肪结合蛋白5抗体(上皮型)
猪α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)试剂盒 Human ZNF846 ELISA Kit脂氧受体1抗体
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猪肌钙蛋白I(Tn-I)试剂盒Human ZNHIT1 ELISA Kit高嗜性粒综合症相关蛋白FIP1L1抗体
猪转录激活因子-3(ATF-3)试剂盒 Human ZNHIT2 ELISA Kit叉头蛋白D4
猪蛋白激D1(PKD1)试剂盒Human ZNF703 ELISA Kit磷化细丝蛋白A抗体
猪阿黑皮原(POMC)试剂盒Human MCPIP(Monocyte Chemoattractant Protein-induced Protein 1) ELISA Kit磷化细丝蛋白A抗体
ACK乙酸激酶检测试剂盒紫外分光光度法小鼠低密度脂蛋白复合物Anti-RIT1 Antibody促甲状腺检测试剂盒
大鼠功能相关抗原3Anti-RIT1 Antibody促甲状腺释放检测试剂盒
人抗信号识别颗粒抗体Anti-RIN3 Antibody促卵泡检测试剂盒
人封闭抗体Anti-RNASE3 Antibody促肾上腺皮质释放检测试剂盒
小鼠解脲脲原体抗体Anti-RNF113B Antibody促肾上腺皮质检测试剂盒
大鼠可溶性血小板内皮粘附分子1Anti-RNF111 Antibody促肾上腺皮质释放因子检测试剂盒
人抗膜DNA抗体Anti-RNF125 Antibody促生长释放检测试剂盒
小鼠神经胶质纤维性蛋白Anti-RNF130 Antibody促胃液检测试剂盒
注意事项:
1、操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
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