当前位置:上海抚生实业有限公司>>生化检测试剂盒>>土壤系列>> SNiR土壤亚硝酸还原酶可见分光光度法
货号 | FS-01S63730 |
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商品介绍:
测定意义
土壤亚硝酸还原酶是反硝化作用中的关键酶之一,参与亚硝酸盐至NO的还原反应,它的活性反映了生物降解过程中氮素的转化效率,为氮素转化规律的研究提供一定的依据。
测定原理
亚硝酸还原酶可将NO2—还原为NO,使样品中参与重氮化反应生成紫红色化合物的NO2—减少,即540nm处吸光值的变化可反应土壤中亚硝酸还原酶的活性。
需自备的仪器和用品
天平、、研钵、可见分光光度计、水浴锅、低温离心机、1mL玻璃比色皿。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
SNiR土壤亚硝酸还原酶可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/24样 | FS-01S63730 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
NLGN4Y 神经元Y连锁蛋白抗体(儿童自闭症相关蛋白) * 0.2ml
SGPL1 磷鞘裂解1抗体 * 0.1ml
MASH1 神经母细胞特异性转移因子抗体 * 0.1ml
GNA12/G protein alpha 12 鸟苷调节蛋白12抗体 * 0.1ml
Squalene Epoxidase 鲨烯环氧抗体 * 0.2ml
MACC1 结肠癌转移相关蛋白1抗体 * 0.2ml
NRXN3 轴突蛋白3抗体 * 0.1ml
Neprilysin 2 脑啡肽2抗体 * 0.2ml
Netrin G2 轴突生长诱向因子G2抗体 * 0.2ml
Neurexin 2 轴突蛋白2抗体 * 0.2ml
Ninjurin 1 神经损伤诱导蛋白1抗体 * 0.2ml
Ninjurin 2 神经损伤诱导蛋白2抗体 * 0.2ml
PCDH11X 原钙粘附蛋白11X抗体 * 0.2ml
PCDH11Y 原钙粘附蛋白11Y抗体 * 0.2ml
PCDH12 原钙粘附蛋白12/血管内皮钙粘蛋白2抗体 * 0.2ml
SNiR土壤亚硝酸还原酶可见分光光度法锌指蛋白471抗体Anti-MXD1 AntibodyStbl3 感受态0.1 mL×10图片
γ-基丁A受体相关膜蛋白3Anti-MYBL1 AntibodyEGY48 酵母感受态10×100μL规格
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