PDH丙酮酸脱氢酶检测试剂盒微量法 返回列表页

产品属性：

商品介绍：

测定意义

PDH（EC 4.1.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶，催化丙酮酸脱梭生成羟乙-TPP，把糖酵解和三羧酸循环连接起来。

测定原理

PDH催化丙酮酸脱氢，同时还原WST-8产生黄色物质，从而导致450nm光吸收的增加。

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容：

公司产品仅用于科研酸性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

碱性提取液：25mL×1 瓶，4℃保存；

试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体 1.5mL×1 支，4℃保存

试剂三：粉剂×1 支，-20℃保存，用时加入 1.6mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂四：粉剂×1 支，4 ℃保存，用时加入 1.9mL 双蒸水，混匀，4℃保存一周；

试剂五：液体 0.7mL×1 支，4 ℃保存；

试剂六：液体 10mL×1 瓶，4 ℃保存；

试剂七：自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。

NAD 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。

NADH 标准品：粉剂×1 支，-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水，即 2umol/mL，将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。

操作步骤：

一、NAD+和 NADH 的提取：

1、血清（浆）中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 酸性提取液，煮沸 5min (盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min；取上清 200uL，加入等体积碱性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清，冰上保存待测。

NADH 的提取：取 0.1mL 血清（浆），加入 0.5mL 碱性提取液，煮沸 5min(盖紧，以防止水分 散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液；混匀，10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

2、组织中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 酸性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积碱性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：称取约 0.1g 组织，加入 0.5mL 碱性提取液，冰浴研磨，煮沸 5min(盖紧，以防 止水分散失)，冰浴冷却后，10000g 4℃离心 10min，取上清 200uL，加入等体积酸性提取液混匀， 10000g 4℃离心 10min，取上清,冰上保存待测。

3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取：

NAD+的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 酸性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取：收集 500 万细胞或细菌，加入 0.5mL 碱性提取液，超声波破碎 1min（强度 20％ 或 200W，超声 2s，停 1s），煮沸 5min(盖紧，以防止水分散失)，冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心 10min，取上清液 200uL 另一新的离心管中，加入等体积的酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4℃ 离心 10min，取上清,冰上保存待测。

下列是公司正在热销的产品：

大鼠血管内皮生长因子B(VEGF-B)试剂盒Anti-OR10C1 Antibody肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ

大鼠血管内皮生长因子C(VEGF-C)试剂盒Anti-OR10D4P Antibody大鼠β内啡肽受体

大鼠血管内皮生长因子D(VEGF-D)试剂盒Anti-OR10C1 Antibody小鼠活化蛋白C

大鼠血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/KDR)试剂盒Anti-OR10G2 Antibody小鼠α葡萄糖苷

大鼠血管内皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)试剂盒Anti-OR10D4P Antibody肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ

大鼠血管活性肠肽(VIP)试剂盒Anti-OR10G6 Antibody大鼠钙/钙调依赖性蛋白激2

大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)试剂盒Anti-OR10G4 Antibody小鼠胰蛋白

大鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)试剂盒Anti-OR10G2 Antibody转化生长因子β1

大鼠III型前胶原(PCIII)试剂盒Anti-OR10G7 Antibody大鼠肝脂

大鼠载脂蛋白A1 (ApoA1) 试剂盒Anti-OR10H1 Antibody转化生长因子α

大鼠载脂蛋白A2 (ApoA2) 试剂盒Anti-OR10G9 Antibody大鼠烟型乙酰胆受体

大鼠载脂蛋白B (ApoB) 试剂盒Anti-OR10H2 Antibody小鼠破骨分化因子

大鼠载脂蛋白E (ApoE) 试剂盒Anti-OR10H3 Antibody大鼠蕈型乙酰胆受体

大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)试剂盒Anti-OR10H4 Antibody小鼠Toll样受体9

大鼠心肌肌钙蛋白I (cTn-I/TNNI3) 试剂盒Anti-OR10J3 Antibody基质衍生因子1β
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猪瘟病包膜糖蛋白E2抗体Human ERK(ELK-Related Tyrosine Kinase) ELISA Kit人B6（VB6）ELISA试剂盒,

冷休克结构域蛋白C2抗体Human EPHA10(Ephrin Type A Receptor 10) ELISA Kit人多巴（DA）ELISA试剂盒,

碳酐10抗体Human EPYC(Epiphycan) ELISA Kit小鼠5羟色（5-HT）ELISA试剂盒,

L选择抗体Human EphA2(Tyrosine protein kinase receptor A2) ELISA Kit大鼠羟脯（Hyp）ELISA试剂盒,

致癌基因C-Myc抗体Human EphA2(Tyrosine protein kinase receptor A2) ELISA Kit大鼠抗增殖核抗原抗体（PCNA）ELISA试剂盒,

胆囊收缩8抗体Human ERK(ELK-Related Tyrosine Kinase) ELISA Kit大鼠白介2（IL-2）ELISA试剂盒,

上皮钙粘附分子抗体Human ERK1(Extracellular Signal Regulated Kinase 1) ELISA Kit大鼠白介18（IL-18）ELISA试剂盒,

注意事项：

1、操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加，必须分开加。

2、反应过程要注意避光。

3、当吸光值大于 1 时，建议稀释后测量，计算公式中应当乘以稀释倍数。