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LPL脂蛋白酯酶检测试剂盒可见分光光度法

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所  在  地上海市

更新时间:2022-03-17 19:15:00浏览次数:187次

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货号 FS-01S63544
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传染性支气管炎病毒细胞甘油三脂脂法格莫瑞(Gomori

产品属性:

产品名称

检测方法

规格

货号

LPL脂蛋白酯酶检测试剂盒可见分光光度法

可见分光光度法

50管/24样

FS-01S63544

商品介绍:

测定意义

脂蛋白酯酶是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞及巨噬细胞等实质细胞合成的一种酶,可催化甘油三脂水解为脂肪酸和单酸甘油酯,以供组织氧化供能和贮存,并在不同的组织表现出不同的生理意义。

测定原理

脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕榈酸酯产生4-硝基苯,在400nm有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿。
产品内容:

公司产品仅用于科研酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;

碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存

试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;

试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;

试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;

试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;

试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。

NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。

NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。

 

11.png 

操作步骤:

一、NAD+和 NADH 的提取:

1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:

NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。

2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:

NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。

3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:

NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。

NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。

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/苏蛋白激ICK抗体Human PTAFR ELISA Kit布尼

纤毛内转运同源蛋白172抗体Human PTBP1 ELISA Kit舒林

注意事项:

1、操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。

2、反应过程要注意避光。

3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。


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