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货号 | FS-01S63866 |
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商品介绍:
测定意义
UDPG焦磷酸化酶是生物体糖原合成过程中的关键酶。在葡萄糖合成糖原前催化葡萄糖活化,将1-磷酸葡萄糖与UTP分子合成为UDP-葡萄糖(UDPG)。
测定原理
UGP可逆催化反应生成1磷酸葡萄糖,在磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下将NADP转化为NADPH,340nm的吸光值增加速率反映了UGP活性。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
UPGUDPG焦磷酸化酶检测试剂盒微量法 | 微量法 | 100管/96样 | FS-01S63866 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
线粒体转录因子A蛋白酪磷mitochondrial transcption factor A
芳香化肿瘤坏死因子α转化Aromatase
吲哚胺2,3-双加氧1多形核白弹性蛋白indoleamine 2,3-dioxygenase 1
己糖激尿激型纤溶原激活物Hexokinase
Flag标签激肽释放8Flag-tag
异分支合激肽释放6isochorismate synthase
异分支裂解果糖1,6二磷缩isochorismate pyruvate lyase
尼克酰胺腺二核苷磷氧化1组织蛋白DNicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1
尼克酰胺腺二核苷磷氧化1敏感性脂肪Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1
突触囊泡蛋白Ⅶ胰激肽原Synaptotagmin VII
亲环D乌头2cyclophilin D
S-腺苷蛋26S蛋白体S-Adenosyl-L-methionine
s腺苷同型半胱周期依赖性激4S-Adenosyl-L-methionine
可溶性腺苷环化胎盘性磷Soluble Adenylate Cyclase
糖原合成受体酪激Glycogen synthase
UPGUDPG焦磷酸化酶检测试剂盒微量法腺苷环化Gα蛋白/Gαs/olf抗体Human VCPIP1 ELISA Kit内皮抑/内皮他丁抗体流式组化
周期蛋白G相关激抗体Human VEZT ELISA Kit胰岛样生长因子结合蛋白-2抗体流式组化
糖基转移8结构域1抗体Human VGLL4 ELISA Kit神经生长因子抗体流式组化
环指蛋白27抗体Human CNDP1(Beta-Ala-His dipeptidase) ELISA Kit蛋白质磷-2A抗体流式组化Anti-PP-2A
透明质结合蛋白1抗体Human VILIP 3 ELISA KitD-鸟盐盐
G蛋白偶联受体激6抗体Human VMAT2 ELISA Kitβ-葡萄糖苷
Rho GTP激活蛋白26抗体Human VMA21 ELISA Kit磷葡萄糖变位
G蛋白α抑制蛋白1抗体Human VASH2(Vasohibin-2) ELISA Kit甘油醛-3-磷脱氢
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