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货号 | A01X2231 | 规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
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组织来源 | 眼角膜组织 | 种属来源 | 兔 |
用途 | 仅供科研实验 | 品牌 | 抚生 |
一、细胞基本属性
产品名称 | 产品规格 | 商品货号 |
兔角膜内皮细胞 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | A01X2231 |
细胞名称:兔角膜内皮细胞
组织来源:眼角膜组织
种属来源:兔
细胞简介:兔角膜内皮细胞分离自眼角膜组织;角膜位于眼球前壁的一层透明膜,约占纤维膜的前1/6,从后面看角膜呈正圆形,从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神经末梢,如有外物接触角膜,眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明,角膜并没有血管,透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层,由前向后依次为:上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。角膜的高度透明性和光学性是正常发挥生理功能的必要条件之一,而角膜内皮细胞(CEC)在维持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜内皮细胞是角膜内层的单层细胞,构成了后弹力层和房水之间的物理屏障,通过离子“泵"功能调节角膜中离子浓度和水分,维持角膜的半脱水状态,保证角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜内皮细胞功能出现紊乱,常导致角膜水肿而使角膜部分甚至失去透明性。角膜内皮细胞主要功能有:①角膜是的无血管的组织,具有透明的特性和合成许多蛋白的功能;②角膜内皮细胞对角膜透明性有重要作用;③角膜内皮细胞通过Na+-K+-ATP酶活性,维持角膜和房水内Na+梯度,防止水分渗入角膜内,维持角膜实质层相对脱水状态,维持透明性。
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
包被条件:PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%胰dan白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
传代比例:1:2
二、使用方法:
兔角膜内皮细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈内皮细胞样,在技术部标准操作流程下,细胞可传可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
公司正在出售的产品:
人成纤维细胞生长因子9(FGF9)试剂盒ELISA | 小鼠杂交瘤细胞;1D5H12F11F8 |
小鼠杂交瘤细胞;3H8H6B1D1 | 人磷脂A2受体抗体(IgG)检测试剂盒elisa |
小鼠杂交瘤细胞;3B10 | 人输血传播病毒(TTV)/辛型肝炎病毒抗体ELISA试剂盒 |
小鼠杂交瘤细胞;IE9B2F9F4 | 人磷烯丙酮羧激,线粒体(PCK2)试剂盒ELISA |
小鼠杂交瘤细胞;1D5H12F1A7 | 人磷葡萄糖脱氢(PGD)ELISA检测试剂盒 |
小鼠杂交瘤细胞;1H7G10D10F7 | 人硫氧还蛋白,线粒体(TXN2)ELISA试剂盒 |
Cas9稳定表达的人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3-Cas9-560 | 人次黄氧化试剂盒ELISA |
小鼠杂交瘤细胞;2C8G10D6F9 | 人磷化腺活化蛋白激(pAMPK)检测试剂盒elisa |
抗人ORM1-like2单抗杂交瘤细胞;ⅠE3-A10 | 人磷化糖原合成激3(pGSK-3)ELISA试剂盒 |
兔颌下腺上皮细胞 | 抗网硬蛋白抗体(ARA)ELISA试剂盒 |
人卵巢畸胎瘤细胞;PA-1 | 人磷化蛋白激B(P-PKB)ELISA检测试剂盒 |
抗人pirin单抗杂交瘤细胞;IIIA3bC1E12D1 | 兔角膜内皮细胞人亮酰-半胱酰肽(LNPEP)ELISA试剂盒 |
永生化人脑微血管内皮细胞 | 人亮富含重复丝/苏蛋白激2(LRRK2)试剂盒ELISA |
小鼠骨髓杂交瘤细胞株;10H4 | 人卵ELISA检测试剂盒 |
小鼠杂交瘤细胞;IIID12-G7 | 人前颗粒蛋白(PGRN)ELISA试剂盒 |
细胞培养注意事项:
公司产品仅用于科研关于原代细胞培养的注意事项。原代细胞培养是一项非常重要的实验技术,掌握好这些注意事项,能让你的实验更顺利。
首先,无菌操作是关键。一定要保持操作环境的清洁,避免细菌或霉菌污染,否则实验就会失败。
其次,选择适合的培养基和血清也很重要。不同细胞对培养基和血清的需求不同,所以要根据细胞类型来选择合适的培养基和血清。
另外,也是细胞培养中的成分。要新鲜配制,在贮存过程中也要定期补充。
在细胞培养过程中,静置培养也是非常重要的。细胞在消化分离后需要一定的时间来适应新环境,所以在这段时间内要避免频繁取出培养瓶观察。
此外,消化时间也要控制得当。通常消化至肉眼可见微小组织颗粒即可,过长的消化时间会导致细胞损伤加重,影响细胞培养成活率。
最后,对于一些特殊类型的细胞,可能需要添加一些特殊的生长因子来促进细胞生长和增殖。但需要注意的是,这些生长因子的费用通常较高。
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