当前位置:上海抚生实业有限公司>>生化检测试剂盒>>糖代谢系列>> αGALα半乳糖苷酶可见分光光度法
货号 | FS-01S63628 |
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商品介绍:
测定意义
α-GAL (EC 3.2.1.22)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,能专一地催化α半乳糖苷键的水解,主要参与棉子糖、水苏糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL对于植物种子的萌发至关重要,种子萌发初期,其催化产生的D-半乳糖通过糖酵解途径迅速转化和消耗,为种子的萌发提供最初的能量来源,后期则主要参与细胞壁储藏多糖水解。
测定原理:
α-GAL分解对-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基苯,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算α-GAL活性。
自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
αGALα半乳糖苷酶可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/24样 | FS-01S63628 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
成纤维生长因子结合蛋白1(FGFBP1)联免疫试剂盒青霉PSMG1/PAC1 Antibody
成纤维生长因子结合蛋白2(FGFBP2)联免疫试剂盒金针菇(毛柄、冬菇)SIRPα/SHPS1 (D6I3M) Rabbit mAb
成纤维生长因子受体底物2(FRS2)联免疫试剂盒大肠埃希SignalSilence® PTP1B siRNA II
成纤维生长因子受体底物3(FRS3)联免疫试剂盒牛瘟病Artemis (D7O8V) Rabbit mAb
迟现抗原(VLA)联免疫试剂盒 芽孢杆p130 Cas (E1L9G) Rabbit mAb
穿孔蛋白1/成孔蛋白(PRF1/PFP)联免疫试剂盒异常汉逊酵母CYP3A4 (D9U6N) Rabbit mAb
卵泡受体(FSHR)联免疫试剂盒 苏云金芽孢杆锡卢亚种UBE1L2/UBA6 Antibody
垂草扁桃(VMA)联免疫试剂盒 甲基杆属TRIM33 (E1N2Z) Rabbit mAb
角质转谷酰(TGM1)联免疫试剂盒根瘤PGD Antibody
垂体腺苷环化激活肽受体 (PACAPR)联免疫试剂盒寄生曲霉ATP-Citrate Lyase (D1X6P) Rabbit mAb
肝配蛋白A受体10 (EPHA10)联免疫试剂盒伪假苍黄PSMC5/TRIP1 Antibody
雌受体β(ERβ)联免疫试剂盒 多主葡萄壳NUP98 (C39A3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
雌受体α(ERα)联免疫试剂盒 无二柠檬杆LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
雌诱导蛋白PS2 (EIPS2)联免疫试剂盒木贼镰孢Phospho-4E-BP1 (Thr70) (D7F6I) Rabbit mAb
肝配蛋白A5 (EFNA5)联免疫试剂盒香菇Phospho-p90RSK (Ser380) (D5D8) Rabbit mAb (PE Conjugate)
αGALα半乳糖苷酶可见分光光度法亚硝基铁化钠 ACS, ≥99.0% (AT)二氧化硅标准溶液 1000μg/mlAnti-AMPK alpha-1(phospho Ser485+Ser491) /FITC 荧光标记磷化腺苷单磷活化蛋白激α1抗体IgG
甲钠 ≥99%, FCC钠标准溶液 1000μg/mlAnti-AMPK beta-1(phospho Ser108) /FITC 荧光标记兔抗人、大、小鼠磷化腺苷单磷活化蛋白激β1抗体IgG
乙钠,三水 GR,99.5%银标准溶液 1000μg/mlAnti-AMPK beta-1(phospho Ser182) /FITC 荧光标记兔抗人、大、小鼠磷化腺苷单磷活化蛋白激β1抗体IgG
氢钠,一水 AR,99%银标准溶液 100µg/mL,基体:1%HNO3Anti-AMPK Beta1/FITC 荧光标记腺苷单磷活化蛋白激β1抗体IgG
氢钠,一水 CP,98%银标准溶液 100μg/mlAnti-Amylin/FITC 荧光标记兔抗糖尿病相关肽/胰岛淀粉样肽抗体IgG
氢钠,一水 99.98% metals basis钪标准溶液 1000μg/mlAnti-Ang- II /FITC 荧光标记血管紧张II抗体IgG
氟化钠 99.99% metals basis1000µg/mL,基体:10%HCLAnti-ANG-2/FITC 荧光标记血管生成-2抗体IgG
氟化钠 PT硒标准溶液 1000μg/mlAnti-Ankyrin G/ANK-3/ankyrin 3/FITC 荧光标记锚定蛋白G抗体IgG
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