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货号 | A01X1300 | 规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
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组织来源 | 肝脏组织 | 种属来源 | 人 |
用途 | 仅供科研实验 | 品牌 | 抚生 |
细胞基本属性:
细胞名称 | 人肝星状细胞 | 商品货号 | A01X1300 |
组织来源 | 肝脏组织 | 种属来源 | 人 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 生长特性 | 贴壁培养 |
细胞形态 | 长梭状,星状细胞 | 传代特性 | 细胞特性确定传代 |
细胞简介:肝星状细胞位于Disse间隙内,紧贴着肝窦内皮细胞和肝实质细胞。其形态不规则 ,胞体呈圆形或不规则形,常伸出数个星状胞突包绕着肝血窦。
正常情况下肝星状细胞表现为富含维生suA脂滴的静止型, 其功能主要有:代谢和 贮存维生suA、储存脂肪、合成和分泌胶原及糖蛋白、蛋白多糖等基质成分、合成 基质金属蛋白酶及其组织抑制剂、表达细胞因子及受体、参与肝窦血流调节。
肝星状细胞是细胞外基质的主要来源,正常情况下肝星状细胞处于静止状态。当 肝脏受到炎症或机械刺激等损伤时, 肝星状细胞被激活, 其表型由静止型转变为 激活型,肝星状细胞激活并转化为肌成纤维细胞样细胞, 各种致纤维化因素均把 HSC作为终靶细胞。激活的肝星状细胞一方面通过增生和分泌细胞外基质参与 肝纤维化的形成和肝内结构的重建, 另一方面通过细胞收缩使肝窦内压升高。
培养基:原代星状细胞培养体系
换液频率:每2-3天换液一次
消化液:0.25%胰dan白酶
培养条件:气相: 空气,95%;CO2 ,5%
注意事项:
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
原代细胞培养方法:
1.准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。
3.处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分钟。
4.剪切:用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块,以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的液,然后一并倒入三角烧瓶中,结扎瓶口或塞以胶塞。
5.消化:或用恒温水浴,或置于37℃温箱消化均可,消化中每隔20分钟应摇动一次,如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。
6.分离:在消化过程中见消化液发混浊时,可用吸管吸出少许消化液在镜下观察,如组织已分散成细胞团或单个细胞,立即终止消化,随即通过适宜不锈钢筛,滤掉尚未充分消化开的组织块。低速(500~1000转/分)离心消化液5分钟,吸出上清,加入适量含有血清的培养液。
7.计数:用计数板计数,如细胞悬液细胞密度过大,再补加培养液调整后,分装入培养瓶中。对大多数细胞来说,pH要求在7.2~7.4范围,培养液呈微红色,如颜色偏黄,说明液体变酸,可用NaHCO3调整。
8.培养:置于36.5℃温箱培养,如用CO2温箱培养,瓶盖需拧松半圈。
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