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货号 | FS-01S63845 |
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商品介绍:
测定意义
强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物;紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为1~10mg蛋白质,适用于蛋白质浓度高的样品,尤其是动物材料。
试剂组成和配置
1、双缩脲试剂×1瓶,4℃保存;
2、10mg/ml标准蛋白×1支,-20℃保存;
3、标准蛋白配制:取10mg/ml标准蛋白100μl加双蒸水100μl,即得5mg/ml标准蛋白溶液。
产品属性:
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
双缩脲法蛋白含量检测试剂盒可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | FS-01S63845 |
产品内容:
酸性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
碱性提取液:25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周;
试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 10mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.5mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 支,-20℃保存。临用前加入 1.4mL 蒸馏水,即 2umol/mL,将其稀释为 1.25nmol/mL 的 NADH 标准溶液备用。
操作步骤:
一、NAD+和 NADH 的提取:
1、血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 酸性提取液,煮沸 5min (盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min;取上清 200uL,加入等体积碱性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:取 0.1mL 血清(浆),加入 0.5mL 碱性提取液,煮沸 5min(盖紧,以防止水分 散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液;混匀,10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
2、组织中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 酸性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积碱性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:称取约 0.1g 组织,加入 0.5mL 碱性提取液,冰浴研磨,煮沸 5min(盖紧,以防 止水分散失),冰浴冷却后,10000g 4℃离心 10min,取上清 200uL,加入等体积酸性提取液混匀, 10000g 4℃离心 10min,取上清,冰上保存待测。
3、细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:
NAD+的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 酸性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
NADH 的提取:收集 500 万细胞或细菌,加入 0.5mL 碱性提取液,超声波破碎 1min(强度 20% 或 200W,超声 2s,停 1s),煮沸 5min(盖紧,以防止水分散失),冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min,取上清液 200uL 另一新的离心管中,加入等体积的酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4℃ 离心 10min,取上清,冰上保存待测。
注意事项:
1、公司产品仅用于科研操作过程应避光。不可将试剂一、二、三和四混合后再加,必须分开加。
2、反应过程要注意避光。
3、当吸光值大于 1 时,建议稀释后测量,计算公式中应当乘以稀释倍数。
下列是公司正在热销的产品:
兔红补体受体1 (CR1)试剂盒 Anti-CDH5 Antibody磷化桩蛋白Paxillin抗体
兔谷胱S-转移θ1(GSTθ1/GSTt1)试剂盒Anti-CDH3 Antibody丝/苏激蛋白Pim1抗体
兔着丝粒蛋白A(CENPA)试剂盒 Anti-CDH4 Antibody磷化前病整合位点蛋白1抗体
兔趋化样因子超家族成员5(CKLFSF5)试剂盒Anti-CDH3 Antibody肽基脯酞顺反异构Pinl抗体
兔腺苷环化2(ADCY2)试剂盒 Anti-CDH5 Antibody磷化肽基脯酞顺反异构Pinl抗体
兔胸腺非依赖性抗原(TI-Ag)试剂盒Anti-CDK1 Antibody磷化孕受体抗体
兔蛋白激抑制剂β(PKIβ)试剂盒Anti-CDK1 Antibody(PB0561)磷化磷脂酰肌激(PI3Kβ)抗体
兔谷胱S转移ω1(GSTω1)试剂盒Anti-CDK2 Antibody(PB0562)磷化蛋白磷2A(PP2Aα)抗体
兔血管生成(ANG)试剂盒Anti-CDK2 Antibody丝/苏蛋白激5抗体
兔膀胱癌抗原(UBC)试剂盒Anti-CDK5 Antibody蛋白激Cα相互作用蛋白1抗体
兔三叶因子1(TFF1)试剂盒Anti-CDK16 Antibody磷相互作用结构域蛋白1抗体
兔甲状腺自身抗体(THAA)试剂盒 Anti-CDK4 Antibody蛋白质磷2调节亚基1A抗体
兔基质金属蛋白17(MMP-17)试剂盒Anti-CDK4 Antibody(PB0563)蛋白质磷2调节亚基1B抗体
兔异常凝血原(APT)试剂盒 Anti-CDK5 Antibody蛋白质磷2调节亚基3A抗体
兔生长分化因子2(GDF2)试剂盒Anti-CDK5R1 Antibody蛋白质磷1B抗体(PP2Cβ)
双缩脲法蛋白含量检测试剂盒可见分光光度法硝钠 GR硫根离子标准溶液1000μg/ml,溶剂:水Anti-Annexin VI/FITC 荧光标记膜粘连蛋白 VI抗体IgG
硝锶 CP,99.0%硫根离子标准溶液100μg/ml,溶剂:水Anti-Anopheles stephensi protein 1/FITC 荧光标记按蚊抗体IgG
硝锶 ACS, ≥99.0% 钐标准溶液 1000μg/mlAnti-ANP/FITC 荧光标记抗心钠肽(心钠)抗体IgG
硝锶 SP硅根标准溶液 1000μg/mlAnti-Anthrax/FITC 荧光标记抗体IgG
亚硫氢钠 AR(K,Na)多元混合标准溶液100μg/mlAnti-Anthrax/FITC 荧光标记抗体(采用活疫苗制备)IgG
亚硫氢钠 CP(As,Sb,Li,Mn,Mo,Ni,P,K,Sc,Na,S)多元混合标准溶液 100μg/mlAnti-ANXA1(Annexin A1)/FITC 荧光标记膜粘连蛋白A1抗体IgG
亚硫氢钠 99.99% metals basis(As,Sb,Bi,Pb,Sn,Na,Cd)多元混合标准溶液 1000μg/mlAnti-AP/ALP/FITC 荧光标记抗性磷抗体IgG
亚硫氢钠 ACS100μg/mlAnti-beta Adaptin/AP2/FITC 荧光标记衔接蛋白β抗体IgG
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