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以下是肉芽肿鞘杆菌PCR检测试剂盒的订购信息:
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
3-氟苯甲醚 456-49-5
三氟甲氧基苯 456-55-3
二甲氨基氯乙烷盐酸 4584-46-7
2-氯-4-吡啶硼酸 458532-96-2
4-氟溴苄 459-46-1
5-溴嘧啶 4595-59-9
4-氟苯甲醚 459-60-9
氟乙酯 459-72-3
对溴氟苯 460-00-4
双氰胺 461-58-5
海因 461-72-3
对氯三氟甲氧基苯 461-81-4
对三氟甲氧基 461-82-5
2-氟-4-甲基吡啶 461-87-0
1-溴-3.5-二氟苯 461-91-6
1-溴-3,5-二氟苯 461-96-1
氟化苯 462-06-6
3-氨基吡啶 462-08-8
三氟四氢络合物 462-34-0
1,5-二氨基戊烷 462-94-2
环己甲酸甲酯 4630-82-4
4-氯丁酰氯 4635-59-0
硫463-71-8
N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛 4637-24-5
氯化胺甲醯 463-72-9
叠氮基*基硅烷 4648-54-8
2-氨基噻吩-3-羧酸甲酯 4651-81-4
4-溴苯乙醇 4654-39-1
2,6-二氯苯甲酰氯 4659-45-4
6-氯吡啶-2-羧酸 4684-94-0
10-甲氧基亚氨基芪 4698-11-7
丙炔酸 471-25-0
碳酸钙 471-34-1
Boc-O-叔丁基-L-酪氨酸 47375-34-8
1,4-环己二酮单乙二醇缩酮 4746-97-8
N-异丙基乙酸 4747-21-1
1,4-二氯酞嗪 4752-10-7
草酰氯单乙酯 4755-77-5
4-硝基吲哚 4769-97-5
3-氯-2-硝基苯甲酸 4771-47-5
2,6-二氯吡嗪 4774-14-5
羧苄青霉素钠 4800-94-6
苯并呋咱 480-96-6
2,2'-联苯二甲酸 482-05-3
2-甲基-3-硝基苯甲醚 4837-88-1
4-甲氧基吲哚 4837-90-5
水合茚三酮 485-47-2
2,3-二氯吡嗪 4858-85-9
alpha-溴苯乙酸 4870-65-9
4-二甲氨基哌啶酸盐酸盐 4876-59-9
3-吲哚甲醛 487-89-8
肉芽肿鞘杆菌PCR检测试剂盒粘溴酸 488-11-9
3-糠酸 488-93-7
4-哌啶基哌啶 4897-50-1
3,4-吡啶二羧酸 490-11-9
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
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