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鸡γ干扰素(IFN-γ)Elisa试剂盒操作步骤

阅读:333发布时间:2014-04-30

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    上海科兴商贸有限公司

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    162B

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    WORD 文档

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检测范围:                                                

3pg/ml-120pg/ml

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡γ干扰素(IFN-γ)水平。用纯化的鸡γ干扰素(IFN-γ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入γ干扰素(IFN-γ),再与HRP标记的鸡γ干扰素(IFN-γ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的γ干扰素(IFN-γ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡γ干扰素(IFN-γ)浓度。

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

  1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

120pg/ml

5号标准品

150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液

60pg/ml

4号标准品

150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液

30pg/ml

3号标准品

150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液

15pg/ml

2号标准品

150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液

7.5pg/ml

1号标准品

150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液


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