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猪超氧化物歧化酶elisa试剂盒操作步骤

阅读:547发布时间:2014-01-08

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    上海科兴商贸有限公司

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    162B

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标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

20U/mL 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液

10U/mL 4 号标准品 150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液

5 U/mL 3 号标准品 150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液

2.5 U/mL 2 号标准品 150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液

1.25 U/mL 1 号标准品 150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。

4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。


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