上海酶联：有关原代细胞的培养方法

1、原代细胞组织块培养法 

(1)按照前述方法选材，将组织剪成或切成1mm3巨细的小块，并参与少量培养基使组织湿润。 

(2)将小块均匀涂布于瓶壁，每小块距离0.2 cm~0.5cm，一般在25mL培养瓶(底面积为17.5cm2)可接种20～30小块为宜,小块放置后,轻轻翻转培养瓶,使瓶底朝上,然后于瓶内参与适量培养基盖好瓶塞,将瓶倾斜放置在37℃温箱内。 

(3)培养2~4小时，待小块贴附后，将培养瓶缓慢翻转平放，静置培养，动作要轻，严禁摇摆和来回振荡，以防因为激动而使小块漂起而形成培养失利，若组织块不易贴壁可预先在瓶壁涂一薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。

2.消化培养法 

该方法是选用前述的消化松散法，原代细胞将阻止细胞生长的细胞间质（包含基质、纤维等）去除，使细胞松散形成细胞悬液，然后分瓶培养。 

3.悬浮细胞培养法

关于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和**细胞无需消化，可选用低速离心别离，直接培养，或经细胞分层液别离后接种培养。