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IFN-Yelisa检测试剂盒有哪些原理

阅读:201发布时间:2018-10-18

IFN-Yelisa检测试剂盒试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人谷氨酰半*连接酶催化亚基捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物显色,在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人谷氨酰半*连接酶催化亚基呈正相关用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;  样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 

弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。


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