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TSZelisa检测试剂盒实验边缘效应问题的分析

阅读:179发布时间:2018-9-18

TSZelisa检测试剂盒实验边缘效应问题的分析
我们在使用ELISA试剂盒96孔板的实验测定的时候,常发现有“边缘效应",也就是外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地排除“边缘效应",并且可提高测定的重复性。 
 还有就是在实验中,必然有使用微量加样器加入样本的步骤。提醒注意:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。ELISA试剂盒太快的话无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。
  ELISA试剂盒使用时一定要根据自己的实验需要购买提取试剂盒,如果不是试剂盒,或许能提出RNA,但不能确保其质量以及完整性。

 


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