1.产品名称：兔骺软骨细胞实验方法
2.组织来源：生长板组织
3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介：
兔骺软骨细胞分离自骨骺生长板；骨骺生长板位于长骨两端骨骺和骨干之间的软骨组织，其中的骺软骨细胞可分裂、成熟、肥大，zui终被骨组织所替换，对于长骨生长具有重要作用。幼稚的骺软骨细胞位于软骨组织的表层，单个分布、体积较小、呈椭圆形，长轴与软骨表面平行，越向深层的骺软骨细胞体积之间增大呈圆形，细胞核圆形或卵圆形，染色浅，细胞质弱嗜碱性，常见数量不一的脂滴。成熟的骺软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内，这些骺软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成，称为同源细胞群。电镜下，骺软骨细胞有突起和皱褶，细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中，骺软骨细胞收缩为不规则形，在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的骺软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
本公司的兔骺软骨细胞采用胶原酶-*联合消化并软骨细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息：
DMEM-F12、FBS、软骨细胞生长添加剂、Vitamin Supplements、Penicillin、Streptomycin等
优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
circumsporozoite protein/Plasmodium yoelii)
碱性磷酸酶（AP）标记的小鼠抗兔IgG Calcitonin
罗丹明标记的小鼠抗兔IgG CTBP1(C-terminal binding protein 1)
FITC标记的小鼠抗兔IgG CTLA-4/CD152
胶体金标记的小鼠抗兔IgG CTn1 (cardiac troponin 1)
FITC标记的小鼠抗兔IgM Cx32(Connexin-32)
碱性磷酸酶（AP）标记的小鼠抗兔IgM CX36 (Connexin-36)
胶体金标记的小鼠抗兔IgM Cx40 (Connexin-40)
*标记的小鼠抗兔IgM cx3cl1(chemokine (C-X3-C motif) ligand 1)
Cy3标记的小鼠抗兔IgM CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1)
Cy5标记的小鼠抗兔IgM Cyclin A
Cy5.5标记的小鼠抗兔IgM Cyclin B1
Cy7标记的小鼠抗兔IgM Cyclin D2
PE标记的小鼠抗兔IgM Cyclin D3(C-term)
APC标记的小鼠抗兔IgM CYP3A4(Cytochrome p450 3A4)
Alexa Fluor 350标记的小鼠抗兔IgM Cyr61/IGFBP10/CCN1(cysteine rich 61)
Cy3标记的小鼠抗大鼠IgG HCMV UL23/HHV5 UL23(Human Cytomegalovirus UL23 Gene)
Cy5标记的小鼠抗大鼠IgG DAD1 (dopamine D1 receptor)
Cy5.5标记的小鼠抗大鼠IgG DRD3 receptor(dopamine D3 receptor)
Cy7标记的小鼠抗大鼠IgG DRD4 receptor peptide
PE标记的小鼠抗大鼠IgG DRD5 receptor(dopamine D5 receptor)
PE-Cy3标记的小鼠抗大鼠IgG DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase)
PE-CY5标记的小鼠抗大鼠IgG DCC (Deleted in colorectal cancer gene)
APC标记的小鼠抗大鼠IgG DCX(Doublecortin)
Alexa Fluor 350标记的小鼠抗大鼠IgG DDB2
PKC(Human protein kinase C) ELISA Kit 人蛋白激酶C 48T
ALD(Human Aldolase) ELISA Kit 人醛缩酶 48T
L-LDH(Human L-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人L-乳酸脱氢酶 48T
ASM(Human acid sphingomyelinase) ELISA Kit 人酸性神经鞘磷脂酶 48T
ALOX-5(Human arachidonate 5-lipoxygenase) ELISA Kit 人花生四烯酸5脂加氧酶 48T
5-LO/LOX(Human 5-lipoxygenase) ELISA Kit 人5脂加氧酶 48T
AC-1(Human adenylyl cyclase 1) ELISA Kit 人腺苷酸环化酶1 48T
sAC(Human Soluble Adenylate Cyclase) ELISA Kit 人可溶性腺苷酸环化酶 48T
ODC(Human Ornithine decarboxylase) ELISA Kit 人*脱羧酶 48T
PTK/CD115(Human protein tyrosine kinase) ELISA Kit 人蛋白*激酶 48T
PTP/PTPase/CD148(Human protein tyrosine phosphatase) ELISA Kit 人蛋白*磷酸酶 48T
TACE(Human TNF Alpha converting enzyme) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子α转化酶 48T
PMN Elastase(Human Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit 人多形核白细胞弹性蛋白酶 48T
uPA/PLAU(Human urokinase-type plasminogen activator) ELISA Kit 人*型纤溶酶原激活物 48T
KLK 8(Human urokinase-type plasminogen activator) ELISA Kit 人*8 48T
KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit 人*6 48T
FDA(Human Fructose-1,6-bisphosphate aldolase) ELISA Kit 人果糖1,6二磷酸醛缩酶 48T
