1.产品名称：兔肺泡巨噬细胞实验方法
2.组织来源：肺组织
3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介：
兔肺泡巨噬细胞分离自肺组织；肺是机体的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆盖于心之上。肺有分叶，左二右三，共五叶。肺经肺系（指气管、支气管等）与喉、鼻相连，故称喉为肺之门户，鼻为肺之外窍。肺泡由单层上皮细胞构成的半球状囊泡。肺中的支气管经多次反复分枝成无数细支气管，它们的末端膨大成囊，囊的四周有很多突出的小囊泡，即为肺泡。巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得，便于培养，并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群，在条件适宜下可生活2-3周，多用做原代培养，难以*生存。巨噬细胞（Macrophages）是一种位于组织内的白血球，源自单核细胞，而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞，在脊椎动物体内参与非特异性防卫（先天性免疫）和特异性防卫（细胞免疫）。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或其他免疫细胞，令其对病原体作出反应。肺泡巨噬细胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活跃，有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬细胞储存器官，为结核病的研究提供了重要的材料。
本公司的兔肺泡巨噬细胞采用机械研磨结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经CD68免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息：
DMEM[H]、FBS、巨噬细胞生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
PE-Cy7标记的兔抗亲和素 FOS B
Cy3标记的兔抗*抗体IgG FRA2/FOSL2(Fos related/like antigen 2)
Cy5标记的兔抗*抗体IgG FOXF1(Forkhead box protein F1)
Cy5.5标记的兔抗*抗体IgG FOXJ1/HFH-4 peptide
Cy7标记的兔抗*抗体IgG FoxP1(Forkhead box P1)
PE标记的兔抗*抗体IgG FOXM1/HFH 11 peptide
PE-Cy3标记的兔抗*抗体IgG Measles virus of fusion protein
PE-CY5标记的兔抗*抗体IgG FSH-R(Follicle-stimulating hormone receptor precursor)
APC标记的兔抗*抗体IgG FSH(Follicle-stimulating hormone precursor)
Alexa Fluor 350标记的兔抗*抗体IgG GABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA) A receptor, alpha 1)
Alexa Fluor 488标记的兔抗*抗体IgG GABAB1(GABAb Receptor 1)
Alexa Fluor 555标记的兔抗*抗体IgG GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2)
Alexa Fluor 647标记的兔抗*抗体IgG GAD-67 (glutamate decarboxylase 67)
PE-Cy5.5标记的兔抗*抗体IgG GADD153(Growth arrest and DNA damage-inducible 153)
PE-Cy7标记的兔抗*抗体IgG phospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 )
*标记的兔抗*抗体IgG GAPDH
碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗*抗体IgG CXCR3/CD183 peptide
FITC标记的兔抗*抗体IgG GATA-3(GATA binding factor 3)
胶体金标记的兔抗*抗体IgG GATA-4(GATA binding factor 4)
HO-1(Human heme oxygenase 1) ELISA Kit 人血红素氧合酶1 48T
iNOS(Human inducible nitric oxide synthase) ELISA KIT 人诱导型一氧化氮合成酶 48T
PL-A2(Human Phospholipidase A2) ELISA Kit 人磷脂酶A2 48T
NOS(Human nitric oxide synthase) ELISA Kit 人一氧化氮合成酶 48T
TE(Human omerase) ELISA Kit 人端粒酶 48T
MMP-5(Human matrix metalloproteinase 5) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶5 48T
MMP-4(Human matrix metalloproteinase 4) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶4 48T
MMP-9/Gelatinase B(Human matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶9/明胶酶B 48T
NSE(Human Neuron-specific enolase) ELISA Kit 人神经特异性烯醇化酶 48T
CK-MB(Human Creatine Kinase MB isoenzyme) ELISA Kit 人肌酸激酶同工酶MB 48T
PAP(Human Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit 人前列腺酸性磷酸酶 48T
PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶 48T
PG-C(Human Pepsinogen C) ELISA Kit 人*原C 48T
PG-A(Human Pepsinogen A) ELISA Kit 人*原A 48T
PLAUR/uPAR(Human Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) ELISA kit 人*型纤溶酶原激活物受体 48T
uPA(Human urokinase plasminogen activator) ELISA kit 人*型纤溶酶原激活物 48T
Tie-2(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 ELISA Kit 人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域*激酶2 48T
