1.产品名称：兔视网膜色素上皮细胞实验方法
2.组织来源：视网膜组织
3.产品规格：5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介：
兔视网膜色素上皮细胞分离自视网膜组织；视网膜居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连，由色素上皮细胞组成，它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层，由外向内分别为：色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜，有感光作用；后部鼻侧有一视神经。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。*神经元是视细胞层，专司感光，它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上，而视锥细胞则在中心凹处zui多。第二层叫双节细胞，约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相，负责联络作用。第三层叫节细胞层，专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构，它贴于眼球的后壁部，传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面，经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的，在黄斑区，其分辨能力zui强。视网膜色素上皮（RPE）位于脉络膜和光感受器细胞外节之间，是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道；主要是由单层色素上皮细胞所构成，排列十分规则。视网膜色素上皮参与*循环，吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性，并分泌多种生长因子，帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。细胞呈多角形，细胞分为三部分，即顶部、体部和基底部。视网膜色素上皮细胞无再生能力，细胞死亡后不被替换，而是邻近的细胞向侧面滑动，以*死亡细胞遗留下来的空间。视网膜色素上皮位于脉络膜和光感受器细胞外节之间，是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道。视网膜色素上皮参与*循环，吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性，并分泌多种生长因子，帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。
本公司的兔视网膜色素上皮细胞采用*-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10^5cells/瓶；细胞经PCK免疫荧光和Dopa染色鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
优势：
1、细胞株种类齐全，包括肿瘤细胞、正常细胞、耐药细胞株，如：人滑膜细胞，人胃癌细胞，人细胞，人肾近曲小管上皮细胞，肝癌细胞，心肌细胞，子宫内膜细胞等
2、*，专业的细胞培养技术指导
3、购买本公司的细胞株，免费复苏
4、客户收到细胞后一天回传细胞图片，三天回传细胞生长状态图片，五天内有问题公司负责重发，超过五天时限至一个月内重发细胞收半价，超过一个月重发全额收费。
5、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，*的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我们还可以提供Elisa试剂盒、细胞株、抗体、血清、培养基、常用生化试剂、耗材。
操作步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽*储存。
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
A
辣根过氧化物酶标记的兔抗马IgG LOX-1/OLR1
*标记的兔抗马IgG LPLUNC1
APC标记的兔抗马IgG LYVE-1(lymphalic vessel endotheilial hyaluronan receptor 1)
Alexa Fluor 350标记的兔抗马IgG ACE( ACE, testis-specific isoform precursor)
Alexa Fluor 488标记的兔抗马IgG Integrin alpha E2 peptide
Alexa Fluor 555标记的兔抗马IgG Mac-1 (Mac-1/CR3/CD11b+CD18)
Alexa Fluor 647标记的兔抗马IgG Mafa(avian)(V-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A)
PE-Cy5.5标记的兔抗马IgG MAGE-1
PE-Cy7标记的兔抗马IgG MAPKK1 (MAP kinase kinase 1)
碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗马IgG ASK1/MAPKKK5
胶体金标记的兔抗马IgG Maspin (mammary serine protease inhibitor)
FITC标记的兔抗马IgG Matriptase
罗丹明标记的兔抗马IgG HCMV UL49(Human Cytomegalovirus UL49 Gene)
PE-CY5标记的兔抗马IgG MC-1R (melanocortin-1-receptor)
Cy3标记的兔抗马IgG Mcl-1(myeloid cell leukemia 1) peptide
Cy5标记的兔抗马IgG MDR1(multidrug resistance 1)
Cy5.5标记的兔抗马IgG MEF2(myocyte enhancer-binding factor 2)
Cy7标记的兔抗马IgG Mfn1 (Mitofusin1)
PE标记的兔抗马IgG MT(metallothionein)
罗丹明标记的兔抗人IgG MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)
胶体金标记的兔抗人IgG MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor)(CT)
碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗人IgG MK(Midkine)
PE-Cy5.5标记的兔抗人IgG MLC/Myosin light chain 3 peptide
REST协阻抑因子3 48T
COLEC11(Human collectin sub-family member 11) ELISA Kit 人集蛋白亚家族成员11 48T
Alpha1 Beta-GP(Human Alpha1 Beta glycoprotein) ELISA Kit 人α1β糖蛋白 48T
sTREM-1(Human soluble Triggering Receptor Expresses on Myeloid Cells-1) ELISA Kit 人可溶性髓系细胞触发受体-1 48T
MSTN(Human Myostatin) ELISA Kit 人肌抑素 48T
MLZE(Human melanomaderived leucine zipper extra-nuclear factor) ELISA Kit 人黑素瘤衍生*拉链额外核因子 48T
UGT2B4(Human uridine dipho-sphate glucuronosyltransferase 2 family polypeptide B4) ELISA Kit 人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4 48T
PPP1R1A(Human protein phosphatase 1 regulatory subunit A) ELISA Kit 人蛋白磷酸酶1调控/抑制因子亚基1A 48T
ABCG2(Human ATP-binding cassette transporter G2) ELISA Kit 人腺苷三磷酸结合盒转运体G2 48T
GDI(Human Guanine nucleotide dissociation Inhibitor) ELISA Kit 人鸟苷酸解离抑制因子 48T
OTF2B(Human octamer transcription factor 2B) ELISA Kit 人八聚体转录因子 48T
OTF2A(Human octamer transcription factor 2A) ELISA Kit 人八聚体转录因子 48T
DUTP(Human deoxyuridinetriphate) ELISA Kit 人脱氧尿三磷酸 48T
CMR(Human costimulatory molecules recptor) ELISA Kit 人协同刺激分子受体 48T
PG(Human peptidoglycan) ELISA Kit 人肽聚糖 48T
LAM(Human Lipoarabinomannan) ELISA Kit 人脂阿拉伯甘露聚糖 48T
MN(Human Mannose) ELISA Kit 人甘露糖 48T
